Bp1 чем открыть: Как открыть файл BP1? Расширение файла .BP1

Содержание

Как открыть файл BP1? Расширение файла .BP1

Что такое файл BP1?

BP1 — это расширение файла, обычно связанное с файлами Smartware Backup Document. Формат Smartware Backup Document был разработан SmartWare Corporation. Файлы с расширением BP1 могут использоваться программами, распространяемыми для платформы Windows. BP1 файл относится к категории Archive Files так же, как #NUMEXTENSIONS # других расширений файлов, перечисленных в нашей базе данных. SmartWare является наиболее используемой программой для работы с BP1 файлами. Программное обеспечение SmartWare было разработано SmartWare Corporation, и на его официальном веб-сайте вы можете найти дополнительную информацию о файлах BP1 или программном обеспечении SmartWare.

Программы, которые поддерживают BP1 расширение файла

Следующий список функций BP1 -совместимых программ. Файлы с суффиксом BP1 могут быть скопированы на любое мобильное устройство или системную платформу, но может быть невозможно открыть их должным образом в целевой системе.

Как открыть файл BP1?

Отсутствие возможности открывать файлы с расширением BP1 может иметь различное происхождение. С другой стороны, наиболее часто встречающиеся проблемы, связанные с файлами Smartware Backup Document, не являются сложными. В большинстве случаев они могут быть решены быстро и эффективно без помощи специалиста. Мы подготовили список, который поможет вам решить ваши проблемы с файлами BP1.

Шаг 1. Установите SmartWare программное обеспечение


Наиболее распространенной причиной таких проблем является отсутствие соответствующих приложений, поддерживающих файлы BP1, установленные в системе. Чтобы решить эту проблему, перейдите на веб-сайт разработчика SmartWare, загрузите инструмент и установите его. Это так просто Полный список программ, сгруппированных по операционным системам, можно найти выше. Одним из наиболее безопасных способов загрузки программного обеспечения является использование ссылок официальных дистрибьюторов. Посетите сайт SmartWare и загрузите установщик.

Шаг 2. Убедитесь, что у вас установлена последняя версия SmartWare

Вы по-прежнему не можете получить доступ к файлам BP1, хотя SmartWare установлен в вашей системе? Убедитесь, что программное обеспечение обновлено. Разработчики программного обеспечения могут реализовать поддержку более современных форматов файлов в обновленных версиях своих продуктов. Если у вас установлена более старая версия SmartWare, она может не поддерживать формат BP1. Последняя версия SmartWare должна поддерживать все форматы файлов, которые совместимы со старыми версиями программного обеспечения.

Шаг 3. Свяжите файлы Smartware Backup Document с SmartWare

Если проблема не была решена на предыдущем шаге, вам следует связать BP1 файлы с последней версией SmartWare, установленной на вашем устройстве. Следующий шаг не должен создавать проблем. Процедура проста и в значительной степени не зависит от системы


Выбор приложения первого выбора в Windows

  • Нажатие правой кнопки мыши на BP1 откроет меню, из которого вы должны выбрать опцию Открыть с помощью
  • Нажмите Выбрать другое приложение и затем выберите опцию Еще приложения
  • Последний шаг — выбрать опцию Найти другое приложение на этом… указать путь к папке, в которой установлен SmartWare. Теперь осталось только подтвердить свой выбор, выбрав Всегда использовать это приложение для открытия BP1 файлы и нажав ОК .


Выбор приложения первого выбора в Mac OS

  • Нажав правую кнопку мыши на выбранном файле BP1, откройте меню файла и выберите Информация.
  • Перейдите к разделу Открыть с помощью . Если он закрыт, щелкните заголовок, чтобы получить доступ к доступным параметрам.
  • Выберите из списка соответствующую программу и подтвердите, нажав « Изменить для всех» .
  • Наконец, это изменение будет применено ко всем файлам с расширением BP1 должно появиться сообщение. Нажмите кнопку Вперед, чтобы подтвердить свой выбор.

Шаг 4. Убедитесь, что файл BP1 заполнен и не содержит ошибок

Вы внимательно следили за шагами, перечисленными в пунктах 1-3, но проблема все еще присутствует? Вы должны проверить, является ли файл правильным BP1 файлом. Вероятно, файл поврежден и, следовательно, недоступен.

1. Проверьте BP1 файл на наличие вирусов или вредоносных программ.

Если BP1 действительно заражен, возможно, вредоносное ПО блокирует его открытие. Немедленно просканируйте файл с помощью антивирусного инструмента или просмотрите всю систему, чтобы убедиться, что вся система безопасна. Если файл BP1 действительно заражен, следуйте инструкциям ниже.

2. Убедитесь, что структура файла BP1 не повреждена

Если файл BP1 был отправлен вам кем-то другим, попросите этого человека отправить вам файл. В процессе копирования файла могут возникнуть ошибки, делающие файл неполным или поврежденным. Это может быть источником проблем с файлом. При загрузке файла с расширением BP1 из Интернета может произойти ошибка, приводящая к неполному файлу. Попробуйте загрузить файл еще раз.

3. Проверьте, есть ли у пользователя, вошедшего в систему, права администратора.

Существует вероятность того, что данный файл может быть доступен только пользователям с достаточными системными привилегиями. Войдите в систему, используя учетную запись администратора, и посмотрите, решит ли это проблему.

4. Проверьте, может ли ваша система обрабатывать SmartWare

Если система перегружена, она может не справиться с программой, которую вы используете для открытия файлов с расширением BP1. В этом случае закройте другие приложения.

5. Проверьте, есть ли у вас последние обновления операционной системы и драйверов

Последние версии программ и драйверов могут помочь вам решить проблемы с файлами Smartware Backup Document и обеспечить безопасность вашего устройства и операционной системы. Возможно, файлы BP1 работают правильно с обновленным программным обеспечением, которое устраняет некоторые системные ошибки.

Open .BP1 File — Открыть .BP1 файл!

Файловое расширения BP1 (open BP1 file) используется операционными системами для распознавания файлов с содержимым типа BP1. Ниже мы предоставим информацию которая поможет вам разобраться в этом типе файлов.

  • Чтобы узнать есть ли у вас приложение которое поддерживает файловое расширение BP1 (more information on how to open BP1 file) вам необходимо два раза щелкнуть мышкой на имени файла.
  • После этого операционная система Windows либо откроет этот файл с соотвествующим приложением, либо предложит вам поискать подходящее приложение на диске или в интернете.
  • Если у вас нет необходимого приложения на вашем компьютере то вам необходимо поискать в интернете приложения которые могут открывать файлы с расширением BP1 — more information on how to open BP1 file

.

Файловые расширения помогают компьютерам найти правильное приложение для открываемых файлов. Операционные системы обычно не смотрят на содержание открываемых файлов. Вместо этого они немедленно анализируют расширение файла и на основе него пробуют найти необходимое для открытия приложение. Такой подход позволяет быстро открывать файлы. Большинство операционных систем требуют использование файловых расширений.

Файловые расширения являются очень полезной вещью. Просто взглянув на название файла мы можем определить тип информации который сохранен в этом файле и какое приложение может быть использованно для этого. Замечали ли вы что когда компьютер не знает как открыть файл он спрашивает вас о том чтобы вы выбрали программу для открытия или предлагает поискать в интернете? Да! Таким образов файловые расширения облегчают работу на компьютере. Если вдруг отсутствует программа для открытия файла, то компьютер немедленно спросит пользователя с выбором нужной программы.

Если вы знаете какие приложение могут окрыть файлы с файловым расширением BP1 (open BP1 file) и это не упомянуто на нашем сайте, пожалуйста пишите нам в нашей контактной форме.

Для более подробной информации о файлах BP1 и другой полезной информации, читайте другие статьи на нашем сайте.

Файл BP1 — Как открыть файл .bp1? [Шаг-за-шагом]

В таблице ниже предоставляет полезную информацию о расширение файла .bp1. Он отвечает на вопросы такие, как:

  • Что такое файл .bp1?
  • Какое программное обеспечение мне нужно открыть файл .bp1?
  • Как файл .bp1 быть открыты, отредактированы или напечатано?
  • Как конвертировать .bp1 файлов в другой формат?

Мы надеемся, что вы найдете на этой странице полезный и ценный ресурс!

1 расширений и 0 псевдонимы, найденных в базе данных

✅ SmartWare Project Backup

.bp1

Описание (на английском языке):
BP1 file is a SmartWare Project Backup. SmartWare is a programming platform. SmartWare also includes a word processor, spreadsheet, and communication modules.

MIME-тип: application/octet-stream

Магическое число: —

Магическое число: —

Образец: —

BP1 псевдонимы:

bp0, bp2, bp3, bp4

BP1 cсылки по теме:

BP1 связанные расширения:

SmartWare Worksheet Backup

SmartWare Macro Backup

SmartWare Worksheet Document

SmartWare Report Definition File

SmartWare Business Graph Definition File

SmartWare Text Graph Definition File

SmartWare Scientific Graph Definition File

SmartWare Elevation Graph Definition File

SmartWare High-Low Graph Definition File

SmartWare Composite Graph Definition File

Другие типы файлов могут также использовать расширение файла .bp1.

🚫 Расширение файла .bp1 часто дается неправильно!

По данным Поиск на нашем сайте эти опечатки были наиболее распространенными в прошлом году:

b1,
bl1,
bo1,
bp,
bpl,
bpw,
fp1,
gp1,
hp1,
p1,
pb1

Это возможно, что расширение имени файла указано неправильно?

Мы нашли следующие аналогичные расширений файлов в нашей базе данных:

Intuit Quickbooks Business Planner File

Binary Picture TIFF Image

HP Graphic Language Document

Flying Pigs for Windows Data

Harpoon Classic Game Data

🔴 Не удается открыть файл .bp1?

Если дважды щелкнуть файл, чтобы открыть его, Windows проверяет расширение имени файла. Если Windows распознает расширение имени файла, файл открывается в программе, которая связана с этим расширением имени файла. Когда Windows не распознает расширение имени файла, появляется следующее сообщение:

Windows не удается открыть этот файл:

пример.bp1

Чтобы открыть этот файл, Windows необходимо знать, какую программу вы хотите использовать для его открытия…

Если вы не знаете как настроить сопоставления файлов .bp1, проверьте FAQ.

🔴 Можно ли изменить расширение файлов?

Изменение имени файла расширение файла не является хорошей идеей. Когда вы меняете расширение файла, вы изменить способ программы на вашем компьютере чтения файла. Проблема заключается в том, что изменение расширения файла не изменяет формат файла.

Если у вас есть полезная информация о расширение файла .bp1, напишите нам!

BP1 Файл — Как открыть файлы BP1

1 расширения(ы) и 0 псевдоним(ы) в нашей базе данных

Ниже вы можете найти ответы на следующие вопросы:

  • Что такое .bp1 файл?
  • Какая программа может создать .bp1 файл?
  • Где можно найти описание .bp1 формат?
  • Что может конвертировать .bp1 файлы в другой формат?
  • Какие MIME-тип связан с .bp1 расширение?

.bp1

SmartWare Project Backup

BP1 file is a SmartWare Project Backup. SmartWare is a programming platform. SmartWare also includes a word processor, spreadsheet, and communication modules.

Категория: Проект файлы

Область применения: SmartWare

Название программы: —

MIME-тип: application/octet-stream

Магия байт (HEX): —

Магия строки (ASCII): —

Синонимы:

bp0, bp2, bp3, bp4

Ссылки:

Расширения, связанные с:

SmartWare Worksheet Backup

SmartWare Macro Backup

SmartWare Worksheet Document

SmartWare Report Definition File

SmartWare Business Graph Definition File

SmartWare Text Graph Definition File

SmartWare Scientific Graph Definition File

SmartWare Elevation Graph Definition File

SmartWare High-Low Graph Definition File

Другие типы файлов могут также использовать .bp1 расширение файла. Если у вас есть полезная информация о .bp1 расширение, написать нам!

Возможно ли, что расширение файла с ошибками?

Мы нашли следующие похожие расширения в нашей базе:

Atari ST DEGAS Elite Block

Magnavox Odyssey 1 Emulator Overlay Image

Binary Picture TIFF Image

Intuit Quickbooks Business Planner File

Flying Pigs for Windows Data

Gerber Internal Plane Layer 1 Data

HP Graphic Language Document

.bp1 Расширение файла часто дается неправильно!

Согласно поисках на нашем сайте, эти опечатки были наиболее распространенными в прошлом году:

bo1 (1),
b1 (1),
pb1 (1),
gp1 (1),
bpw (1),
bp (1),
bl1 (1),
p1 (1),
fp1 (1),
bpl (1)

Не удается открыть .bp1 файл?

Если вы хотите открыть .bp1 файл на вашем компьютере, вам просто необходимо иметь соответствующие программы установлены. Если bp1 Ассоциации установлены неправильно, вы можете получить следующее сообщение об ошибке:

Не удалось открыть этот файл:

файла: Например.bp1

Чтобы открыть этот файл, Windows необходимо знать, какую программу вы хотите использовать, чтобы открыть его. Окна могут выходить в интернет, чтобы искать его автоматически, или вы можете вручную выбрать из списка программ, установленных на вашем компьютере.

Чтобы изменить ассоциации файлов:

  • Щелкните правой кнопкой мыши файл с расширением чье сотрудничество вы хотите изменить, а затем нажмите Открыть с.
  • В Открыть с помощью диалоговое окно, выберите программу ти котором вы хотите, чтобы открыть файл, или нажмите Обзор, чтобы найти программу, которую вы хотите.
  • Выберите Всегда использовать выбранную программу, чтобы открыть такой файл флажок.

Поддерживаемые операционные системы

Windows Server 2003/2008/2012/2016, Windows 7, Windows 8, Windows 10, Linux, FreeBSD, NetBSD, OpenBSD, Mac OS X, iOS, Android

Расширение файла .BP1 Как открыть файл .BP1?

Самой частой причиной проблем с раскрытием файла BP1 является просто отсутствие соответствующих приложений, установленных на Вашем компьютере. В таком случае достаточно найти, скачать и установить приложение, обслуживающее файлы в формате BP1 — такие программы доступны ниже.

Программы, открывающие файл BP1

Windows
  • SmartWare
Почему я не могу открыть файл BP1?


Проблемы с файлами BP1 могут иметь также другую почву. Иногда даже установление на компьютере программного обеспечения, обслуживающего файлы BP1 не решит проблему. Причиной невозможности открытия, а также работы с файлом BP1 может быть также:

— несоответственные связи файла BP1 в записях реестра

— повреждение файла BP1, который мы открываем

— инфицирование файла BP1 (вирусы)

— слишком маленький ресурс компьютера

— неактуальные драйверы

— устранение расширения BP1 из реестра системы Windows

— незавершенная установка программы, обслуживающей расширение BP1

Устранение этих проблем должно привести к свободному открытию и работе с файлами BP1. В случае, если компьютер по-прежнему имеет проблемы с файлами, необходимо воспользоваться помощью эксперта, который установит точную причину.

Мой компьютер не показывает расширений файлов, что сделать?

В стандартных установках системы Windows пользователь компьютера не видит расширения файлов BP1. Это успешно можно изменить в настройках. Достаточно войти в «Панель управления» и выбрать «Вид и персонализация». Затем необходимо войти в «Опции папок», и открыть «Вид». В закладке «Вид» находится опция «Укрыть расширения известных типов файлов» — необходимо выбрать эту опцию и подтвердить операцию нажатием кнопки «OK». В этот момент расширения всех файлов, в том числе BP1 должны появится сортированные по названию файла.

Быстрый способ открытия файлов с BPI Extension

Загрузить Просмотр файлов Универсальный (File Magic) 

Установить необязательные продукты — File Magic (Solvusoft) | EULA | Privacy Policy | Terms | Uninstall

Если у вас нет IBM Voice Type languages Newuser File

Чтобы открыть файл BPI, вам придется загрузить IBM Voice Type languages Newuser File или другой аналогичный пакет программного обеспечения.

Если ваш компьютер не настроен для открытия BPI Files

Если у вас есть соответствующее программное обеспечение, но ваш компьютер все еще не откроет программное обеспечение, вам придется изменить ассоциации файлов на Windows или Mac.
В зависимости от вашей операционной системы вы можете убедиться, что ваш компьютер всегда открывает файлы BPI с помощью IBM Voice Type languages Newuser File или другой программы по вашему выбору, которая использует файлы BPI.

Если это все еще не работает, вы можете связаться с разработчиком программного обеспечения, чтобы узнать, что вы можете сделать. Вы можете связаться с любым из этих разработчиков для получения дополнительной информации или помощи:

Программного обеспечения разработчик
IBM Voice Type languages Newuser File PC Software Company

Если файл BPI поврежден

В некоторых случаях вы можете получить сообщение об ошибке, сообщающее, что файл поврежден. Если вы пробовали все вышеперечисленное, и он все еще не работает, загрузите или запросите новую копию, чтобы узнать, работает ли это.


Открыть BPI Сделать простой способ

Если вы не хотите загружать IBM Voice Type languages Newuser File (по какой-либо причине), а остальные варианты также не работают … это нормально!

Even though some BPI files must be opened in a program for which it was developed (binary format), you may still be able to open it in a universal file viewer such as File Magic. Download File Magic now from the Microsoft Store and open your BPI file!

Рекомендуем

Sorry, your browser doesn’t support embedded videos.

Загрузить Просмотр файлов Универсальный (File Magic) 

Установить необязательные продукты — File Magic (Solvusoft) | EULA | Privacy Policy | Terms | Uninstall

Руководство

  1. Задайте
    предустановку размера листа, или введите
    заказной формат страницы.

Рассматривайте
лист как виртуальный (или логический)
холст, на котором чертится Ваша диаграмма.
Мы говорим виртуальный, потому что этот
размер листа может соответствовать
(или нет) физическим размерам бумаги,
на которой он будет в конечном счете
напечатан.

ВРwin
автоматически вычитает небольшое
количество из предустановленных размеров
листа, чтобы учесть не печатающуюся
граничную область, имеющуюся у большинства
принтеров. Если Вы вручную вводите
размер листа. Вы должны вручную вычесть
соответствующее количество.

  1. Щелкните кнопку
    «ОК», чтобы принять установку
    страниц, или кнопку «Cancel», чтобы
    возвратиться к диаграмме без сохранения
    установки.

Рисунок 1 Диалог
Page Setup.

Задание
установок страницы для новой модели

Сначала откройте
диалог New Model Page Setup.

Выберите размер
страницы «С» и отсутствие границы
IDEFO. Щелкните «ОК», чтобы выйти из
редактора.

Теперь создайте
новую модель (из меню Е«1е, выберите
New).

Просто прокручивая
диаграмму. Вы немедленно обнаружите,
что контекстная диаграмма много больше,
чем размер по умолчанию «А». Как Вы
увидите позже, при печати можно уменьшить
размер любой диаграммы, так что будет
возможно напечатать эту большую диаграмму
на странице правильного размера.

Снова откройте
диалог New Model Page Setup и переустановите
размер страницы в его нормальную
установку. Выберите все опция границы
и нажмите «ОК», чтобы выйти из
редактора. Теперь закройте модель,
которую Вы только что создали.

Задание
установок страницы для существующей
модели

Откройте TUT1-O.BP1.
Откройте диалог Default Page Setup.

Выберите размер
страницы «С» и отсутствие границы
IDEFO. Щелкните «ОК», чтобы выйти из
редактора.

Создайте новую
диаграмму в этой модели. Вы можете
создать либо FEO диаграмму, либо новую
декомпозицию.

Заметьте, что вновь
созданная диаграмма имеет размер «С»
и не имеет границу. Тем не менее,
существующие диаграммы не изменили
размер.

Закройте TUT1-O.BP1
без сохранения.

Установка
печати

Как только Вы имеете
желаемую установку страниц и Вы готовы
печатать, BPwin обеспечивает Вас
гибкостью в решении, что печатать и
какого размера. BPwin
позволяет Вам «раздувать» Вашу
диаграмму, так что она печатается
большей, чем она показывается на экране.
Поскольку ВРwin использует шрифты
True Type, Вы можете печатать Ваши диаграммы
фактически любого размера.

Используйте диалоги
установки печати, чтобы установить
информацию о принтере и о расположении
страницы. По умолчанию, диаграммы
печатаются горизонтально, а отчеты
вертикально. Вы можете изменить эти
опции, а также установить Ваш целевой
принтер с помощью этого диалога.

Чтобы
установить работу печати

  1. Выберите опцию
    меню «Print Setup» из меню file, чтобы
    установить диаграмму или модель для
    печати, или выберите опцию меню «Print
    Setup» из меню Report,
    чтобы установить отчет для печати.

  2. Выберите опции,
    которые Вы хотите, и щелкните кнопку
    «QK».

Для большей
информации о печати и установке печати,
см. Вашу документацию по Microsoft Windows.

Печать
диаграммы или модели

BPwin обеспечивает
опции для печати отдельной диаграммы,
выбранного набора диаграмм, или всех
диаграмм в модели. Вы можете также
определить, хотите ли Вы печатать рамку
IDEFO, а также определить, насколько Вы
хотите масштабировать Вашу печатную
работу.

Чтобы
напечатать диаграммы

BPwin

  1. Выберите опцию
    меню «Print…» из меню Е«1с. чтобы
    показать диалог Print, как на Рисунке 2 на
    стр.151.

  2. Чтобы напечатать
    только текущую диаграмму, выберите
    кнопку опции «Current Diagram» (которая
    выбрана по умолчанию).

Чтобы напечатать
все диаграммы, выберите кнопку опции
«Д11 Diagrams».

Чтобы напечатать
определенные диаграммы, выберите кнопку
опции «Selected Diagram(s)». Укажите и
щелкните, чтобы выделить диаграммы,
которые Вы хотите напечатать. Диаграммы
FEO имеют букву «F» после идентификатора
диаграммы. Деревья узлов имеют букву
«N» после идентификатора диаграммы.
Щелчок на файлах включает и выключает
их выбор.

  1. Выберите масштаб
    печати для Вашей диаграммы. По умолчанию,
    он установлен в 100%, но последняя установка
    масштаба, использовавшаяся для печати,
    сохраняется.

  2. Введите число
    копий, которое Вы хотите сделать.

  3. Выберите, хотите
    ли Вы печатать текстовые диаграммы
    наряду с диаграммами декомпозиции,
    выбирая или отменяя выбор выключателя
    «Print Text Diagram».

Т

Определена
текстовая диаграмма

екстовая диаграмма обеспечивает
дополнительное текстовое описание
сопровождающей ее декомпозиции или
контекстной диаграммы. Кроме того,
родительская диаграмма диаграммы
печатается в уменьшенном размере в
верхнем правом углу первой страницы
текстовой диаграммы. Вы вводите текст
для этой диаграммы в редакторе Diagram
Definition.

  1. Выберите, хотите
    ли Вы печатать без границы, только
    верхнюю границу, или полную диаграмму,
    и щелкните кнопку «О.К», чтобы
    напечатать диаграмму.

Рисунок
2 Диалог BPwin Print.

Появляется диалог
подтверждения печати, давая Вам знать,
что Ваша диаграммы печатаются. Щелкните
кнопку «Cancel», чтобы отменить работу
печати.

Д

Упражнение
8.1

ля этого упражнения, мы хотим
напечатать одну копию каждой диаграммы
на отдельной странице с полной границей,
так что оставьте Print Scale установленным
в 100% и щелкните кнопку «QK». Если Вы
хотите попробовать напечатать большую
копию Ваших диаграмм, выберите 200% и
щелкните кнопку «QK».

Встраивание
диаграммы
BPwin
в другое приложение

Диаграмма ВРwin
может быть легко вставлена в любое
приложение, которое принимает Windows Meta
File (WMF) изображения.

  1. Выберите диаграмму,
    которую нужно скопировать, и убедитесь,
    что это активная в настоящее время
    диаграмма (полоска заголовка будет
    другого цвета на активной диаграмме).
    Верхняя диаграмма (диаграмма, не закрытая
    никакой другой), обычно является активной
    диаграммой.

  2. Используйте меню
    Zoom, чтобы подобрать размер диаграммы
    так, чтобы часть, которую нужно
    скопировать, была полностью видима.
    Вам, возможно, также необходимо подобрать
    размер границе окна диаграммы.

  3. Выберите Edit. Copy
    Picture.

  4. В целевом приложении
    вставьте изображение. Точные шаги будут
    специфичны для приложения. В MS Word,
    например, позиционируйте курсор и
    выберите Edit. Paste.

  5. Если целевое
    приложение поддерживает изменение
    размера изображения. Вы сможете изменить
    размер вставленного изображения.
    Обратите внимание, что файлы WMF сохраняют
    всю их ясность и разрешение независимо
    от их размера, в отличие от bitmap, которые
    не могут быть очень хорошо откалиброваны.

Создание
отчетов

ВРwin предлагает
на выбор несколько отчетов, каждый с
полный набором опций, которые можно
выбирать. Все отчеты расположены в меню
Report.
Для каждого отчета. Вы можете
выбрать любые или все опции отчета. Вы
можете также выбрать из набора форматов
отчета, включая Microsoft DDE формат, который
генерирует для Вашего любимого DDE
приложения (где поддерживается).

Выбор
отчета BPwin

Отчеты BPwin
обеспечивают гибкость как в формате,
так и в содержании отчетов, которые Вы
создаете.

Отчеты ВРwin:

  • Отчет модели

  • Отчет активности

  • Отчет стрелки

  • Отчет непротиворечивости
    модели

  • Отчет использования
    данных

  • Отчет основанной
    на активности стоимости (АВС, Activity Based
    Costing)

Выбор
опции отчета

Диалоги отчета
состоят из набора информации о типе
отчета. Например, если Вы выбираете
отчет активности, Вы имеете опции для
отображения информации активности,
информации определения, информации о
версии, и связанной информации стрелки.

Выбор опций отчета
делаются либо помещая курсор на
выключателе опции и щелкая левой кнопкой
мыши, либо используя клавишу TAB, чтобы
передвигаться по опциям, и нажимая
клавишу пробела, чтобы сделать выбор.

Вы
можете легко изменить порядок информации
в любом отчете. Информация отчета
помещается в отчет в том порядке, в
котором щелкаются выключатели

Предосмотр
отчета

Из любого диалога
отчета Вы можете предварительно осмотреть
Ваш отчет. ВРwin
открывает окно Preview вверху окна отчета.
Отчеты размером меньше 32000 символов
могут редактироваться внутри окна
предосмотра и затем печататься. Отчеты
размером более 32000 символов будут усечены
в окне предосмотра, но будут печататься
полностью, хотя Вы не можете сделать
изменения в них в окне просмотра.

Чтобы
просмотреть отчет

Из любого диалога
отчета, щелкните кнопку «Preview…».

Чтобы максимизировать
окно Preview; щелкните на стрелке вверх в
верхнем правом углу так, чтобы отчет
заполнил экран.

Чтобы напечатать
и сгенерировать отчеты непосредственно
из окна Preview, щелкните кнопки «Print»
или «Report…». Окно просмотра будет
автоматически закрыто после завершения
печати или отчета, и Вы возвратитесь в
главное окно отчета.

Чтобы возвратиться
в окно отчета, щелкните на кнопке «Close».

Отмена
отчета

Вы можете отменить
отчет из диалога выбора опции, из окна
просмотра или даже при печати.

Чтобы
отменить отчет

Щелкните кнопку
«Close» из диалога выбора отчета,
чтобы

возвратиться к
Вашей модели.

Щелкните кнопку
«Close» из предосмотра отчета,
чтобы

возвратиться к
диалогу выбора отчета.

Щелкните кнопку
«Cancel» из диалога подтверждения
печати,

чтобы отменить
посылку отчета на принтер.

Стандартные
отчеты

Часто бывает
необходимо произвести обновленную
версию отчета нескольких раз в течение
проекта. В этой версии BPwin, Вы можете
задать формат отчета (то есть — поля,
которые нужно поместить в отчет и их
порядок) один раз и повторно использовать
формат по мере необходимости. Эта
особенность доступна в отчетах активности,
стрелки, стоимости активности и
использования данных. ВРwin включает
несколько предопределенных стандартных
отчетов для непосредственного
использования.

Определение
стандартного отчета

  1. Задайте желаемые
    поля и опции печати.

  2. Введите имя отчета
    в поле «Standard Reports».

  3. Нажмите «New».

Удаление
стандартного отчета

  1. Выберите отчет из
    выпадающего списка.

  2. Нажмите «Delete».

Обновление
существующего стандартного отчета

  1. Выберите отчет из
    выпадающего списка.

  2. Выберите
    соответствующие поля и опции, пока
    отчет не будет в желаемом формате.

  3. Нажмите «Update».

Повторное
использование стандартного отчета

  1. Выберите отчет из
    выпадающего списка.

Файл
BPWINRPT.INI

Файл BPWINRPT.INI содержит
информацию определения отчета для всех
стандартных отчетов. Этот файл расположен
в директории по умолчанию Windows — обычно
C:\WINDOWS. BPwin назначит
имя отчета внутреннему коду. Каждый тип
отчета имеет различный код:

Отчет активности
BPACTnnn

Отчет стоимости
активности BPACCnnn

Отчет стрелки
BPARRnnn

Отчет использования
данных BPDUSnnu

…где nnn — три цифры,
начиная с 000.

Обратите внимание:
.INI файл не предназначен для того, чтобы
модернизироваться вручную. Всегда
делайте изменения, используя диалоги
отчета.

Стандартные
отчеты, которые включают определенные
пользователем свойства

Если определенные
пользователем свойства (UDP) используются
в стандартном отчете, будьте осторожны,
используя этот же самый отчет с другой
моделью. ВPwin хранит индекс определенного
пользователем свойства (позиция, которую
занимает определенное пользователем
свойство, а не имя определенного
пользователем свойства). Чтобы
гарантировать, что правильное определенное
пользователем свойство используется
в различных моделях, определенные
пользователем свойства должны занимать
то же самое место в каждой модели.
Например, пусть даны две модели,’ которые
имеют одни и те же UDP в различном порядке:

Определенные
пользователем свойства модели ‘А’

  1. Ответственная
    сторона

  2. Анимация процесса

  3. Документ Word описания

  4. Таблица Excel стоимости

Определенные
пользователем свойства модели ‘В’

  1. Ответственная
    сторона

  2. Таблица Excel стоимости

  3. Документ Word описания

  4. Анимация процесса

Отчет, который
использует Ответственную сторону и
Документ Word описания, будет работать с
обеими моделями, потому что эти UDP
занимают то же самое положение (1 и 3) в
обеих моделях. Отчет, который использует
UDP Ответственную сторону и Анимацию
процесса, будет работать правильно
только с моделью «А», потому что
эти UDP занимают иное положение в модели
«А» (1 и 2), чем в модели «В» (1 и
4). К счастью, Вы можете легко перестроить
определенные пользователем свойства,
используя кнопки Up и Down в редакторе
User-Defined Property Definition.

Установка
шрифта отчета

Если
Вы посылаете Ваш отчет на принтер (вместо
файла) Вы

имеете
возможность устанавливать шрифт, в
котором Ваш отчет будет сгенерирован.

Чтобы
установить шрифт для Вашего отчета

  1. Выберите
    опцию меню «Default Fonts…» из меню
    Report
    чтобы
    показалось выпадающее меню.

  2. Выберите
    опцию меню «Report Text…» из выпадающего
    меню, чтобы показать редактор Report Font.

  3. Сделайте
    выбор шрифта, как Вы хотите, и щелкните
    кнопку «QK».

Печать
отчета

Вы можете либо
послать Ваш отчет на целевой принтер,
либо иметь напечатать его в файл. Если
Вы выбрали печатать в файл. Вы можете
выбрать из множества ASCII форматов, или
Microsoft DDE формат.

Чтобы
послать отчет на принтер

Щелкните кнопку
«Print…» из любого диалога выбора
отчета или из просмотра отчета.

Появится диалог
подтверждения печати, сообщая Вам, что
работа печати закончена. ВРwin
автоматически расположит отчеты, которые
охватывают много страниц, в ширину и
высоту.

Чтобы
послать отчет в файл

  1. Щелкните кнопку
    «Report…» либо из диалога выбора
    отчета, либо из просмотра отчета, чтобы
    показать диалог генерации файла.

  2. Назовите файл,
    который нужно сгенерировать и щелкните
    кнопку «QK».

Все, что Вы должны
делать — напечатать имя. BPwin автоматически
помещает идентификатор расширения в
конце имени файла (см. список расширений
ниже).

Или, если Вы называете
Ваш файл с заказным расширением (например,
file_name.txt,
чтобы Вы могли открыть его
редактором), то файл генерируется в
указанную директорию, и может использоваться
с любым текстовым процессором, текстовым
редактором, или настольной издательской
системой.

Расширения файлов,
создаваемых BPwin

.ВРМ = Отчет модели

.ВРА = Отчет
активности

.BPR = Отчет стрелки

.ВРА = Отчет
основанной на активности стоимости

.ВРС = Отчет
непротиворечивости модели

.BPU = Отчет
использования данных

У

Упражнение
8.2

становите печать отчета в вертикальный
формат Установите шрифт в Courier 12 пунктов.

Использование
отчетов табличного формата DDE с другими
приложениями

Используя табличный
формат DDE, Вы можете заставить ВРwin
автоматически открывать либо приложение
Microsoft Word, приложение WordPerfect, приложение
Ami Pro, либо приложение Microsoft Excel и построить
Ваш отчет ВРwin в табличном формате
в целевом приложении. Чтобы сделать
это, Вы выбираете опции, которые Вы
хотите показать, как Вы обычно делаете
в диалоге отчета.

Затем выберите
переключатель формата «DDE Table» и
многозначные опции, которые Вы
предпочитаете. Затем щелкните кнопку
«Report». BPwin спросит Вас, какие из
поддерживаемых приложений использовать.
Если приложение уже открыто. Вы можете
выбрать поместить Ваш отчет в новый
документ или в существующий. Если Вы
выбираете существующий документ, отчет
будет вставлен там, где в настоящее
время расположен курсор в этом документе.

Когда Вы выбираете
приложение, ВРwin
открывает его автоматически (если оно
не уже открыто) и строит таблицу с данными
отчета в приложении. Вы увидите изображение
песочных часов, пока обрабатывается
отчет. Когда песочные часы исчезнут и
изображение стрелки указателя возвратится
в диалог отчета, таблица Word, WordPerfect, Ami
Pro, или Excel открывается и ждет в фоновом
режиме. Для большей информации об
использовании DDE, см. Вашу документацию
Windows 3.1.

Выбор Word 2.0 или Word 6.0
как DDE цели

Если приложение
не запущено, ВРwin попробует загрузить
его. ВРwin сначала попробует загрузить
Word 6.0, и, если это не удастся, 2.0. Вы может
определить, какую версию Word BPwin должен
пытаться запускать. Это полезно, если
Вы имеете обе версии Word на Вашей машине.

Чтобы
задать Word 2.0 или Word 6.0 как цель DDE

  1. Выберите опцию
    меню «Preferences…» из меню Options.

  2. Выберите Word 2.0
    или
    Word 6.0 как цель DDE.

  3. Щелкните кнопку
    «OK».

Примечание: Это
необходимо, только если Вы используете
Microsoft Word. Все другие приложения однозначно
идентифицируют определенные версии, и
поэтому ВРwin может идентифицировать
надлежащие команды для использования.

Генерация
отчетов для RPT
win

RPTwin
новый продукт Logic Works — инструмент
отчета, разработанный для того, чтобы
увеличить возможности отчета ВРwin
и ERwin. RPTwin
обеспечивает настоящую
графическую среду проектирования,
которая дает Вам полный контроль над
физическим внешним видом Вашего отчета,
используя заголовки и сноски, шрифты
Windows, встроенные чертежные инструменты,
редактор формул и множество стилей.

Чтобы создать новый
отчет RPTwin

Чтобы произвести
новый отчет для RPTwin, определите
содержание отчета в ВРwin, как Вы
обычно делаете, выберите RPTwin
как формат отчета, и нажмите кнопку
«Report». Это показывает диалог Save As,
назначает имя по умолчанию, и добавляет
.LWD к имени. Когда Вы щелкните на кнопке
«ОК», файл данных создается и
RPTwin
открывается. Вы можете затем
форматировать отчет, как желаете, и
сохранить формат в файле Logic Works Report
Definition (.LWR).

Файлы данных (LWD) и
формата (LWR) RPTwin

По умолчанию, один
файл LWR связывается с файлом LWD. Однако,
один файл LWR может поддерживать много
файлов LWD. Чтобы разрешить одному LWR
(формат отчета) файлу поддерживать
несколько LWD (отчет) файлов, Вы можете
временно или постоянно изменить опции
DataSet для файла LWR в RPTwin. Обратитесь
к документации RPTwin за определенными
деталями.

Опции
многозначного формата

Каждый из отчетов
BPwin имеет опции многозначного
формата. Они позволяют Вам лучше
справляться с форматированием отчетов,
где то же самое значение в одном столбце
отчета связано со многими значениями
в другом столбце отчета. Простой пример
этого — одно имя активности, связанное
с (обычно) многими именами его стрелок.
Опции многозначного формата позволяют
Вам несколько выборов того, как обработать
эту one-to-many ситуацию.

Опция «Repeating
Group» объединяет много значений в одной
ячейке, вставляя «+» между значениями.

Имя активности

Имя входа

RUN VIDEO STORE

Income +

Job Applicants +

Returned Tapes +

Tape Shipment +

Vendor Special Offer
Data +

Рисунок 3. Пример
таблицы, созданной в MS Word с опцией
многозначного формата «Repeating Group».

Опция «Filled»
повторяет все данные для каждого ряда.
В нашем простом примере это повторит
имя активности в каждом ряде для каждой
стрелки.

Имя активности

Имя входа

RUN VIDEO STORE

Income

RUN VIDEO STORE

Job Applicants

RUN VIDEO STORE

Returned Tapes

RUN VIDEO STORE

Vendor Special Offer
Data

Рисунок 4. Пример
таблицы, созданной в MS Word с опцией
многозначного формата «Filled».

Опция «Header»
показывает родительский или «корневой»
объект один раз, вместо повторения его
для каждого ряда. В нашем примере, ячейки
в таблице, которые должны были иметь
повторенное имя активности, будут
оставлены пустыми. Дополнительный
выбор, который Вы имеете в этой опции —
хотите Вы или нет, чтобы много рядов
значений были слиты с рядом родительских
объектов, или они должны начаться в
следующем ряде. Вы управляете этим с
помощью переключателя «Merge».

Имя активности

Имя входа

RUN VIDEO STORE

Income

Job Applicants

Returned Tapes

Vendor Special Offer
Data

Рисунок 5. Пример
таблицы, созданной в MS Word с опцией
многозначного формата «Header» и включенной
опцией «merge».

Имя активности

Имя входа

RUN VIDEO STORE

Income

Job Applicants

Returned Tapes

Vendor Special Offer
Data

Рисунок 6. Пример
таблицы, созданной в MS Word с опцией
многозначного формата «Header» и включенной
опцией «merge».

Отчет
модели

Отчет модели
содержит опции отчета для всей информации
об определенной модели.

Чтобы
создать отчет модели

  1. Выберите опцию
    меню «Model Report…» из меню Report,
    показать диалог выбора опции.

  2. Щелкните на пунктах,
    которые Вы хотите, в том порядке, в
    котором Вы хотите поместить их в
    отчет. Номер показывается рядом с каждым
    пунктом, чтобы указать порядок.

  3. Используйте кнопку
    «Close», чтобы отменять отчет.

Используйте кнопку
«Preview…», чтобы просмотреть отчет
на экране (см. Предосмотр отчета выше).

Используйте кнопку
«Print…», чтобы послать отчет на
выбранный Вами принтер.

Используйте кнопку
«Report…», чтобы создать Ваш отчет
как файл.

Отчет
активности

Отчет активности
содержит опции отчета для всей информации
об активностях в определенной модели.

Чтобы
создать отчет активности

  1. Выберите опцию
    меню «Activity Report…» из меню Report,
    чтобы показать диалог выбора опций.

  2. Щелкните на
    выключателях, которые Вы хотите, в том
    порядке, в котором Вы хотите видеть
    их
    в отчете. Щелкните кнопку «Activity
    Category…», чтобы управлять изображением
    определенных пользователем свойств в
    этом диалоге.

  3. Используйте кнопку
    «Close», чтобы отменить отчет.

Используйте кнопку
«Preview…», чтобы просмотреть отчет
на экране (см. Предосмотр отчета
выше).

Используйте кнопку
«Print…», чтобы послать отчет на
выбранный Вами принтер.

Используйте кнопку
«Report…», чтобы создать Ваш отчет
как файл.

Выбор
порядка сортировки активности и стрелки

Диалог выбора
отчета активности позволяет Вам
определить порядок сортировки активности
и стрелки для создаваемого отчета.

Alphabetical сортирует
в нормальном алфавитном порядке.

Hierarchical сортирует
по номеру активности, со всей связанной
информацией после активности, которую
она определяет; то есть, глубина вперед.

Breadth First сортирует
сначала родителя и связанные стрелки
затем дочерние и связанные стрелки;
порядок сортировки диктуется номерами
идентификации.

Отчет
стрелки

Отчет стрелки
содержит опции отчета для всей информации
о всех типах стрелок в определенной
модели.

Чтобы
создать отчет стрелки

  1. Выберите опцию
    меню «Arrow Report…» из меню Report, чтобы
    показать диалог выбора опций.

  2. Щелкните на
    выключателях, которые Вы хотите, в том
    порядке, в котором Вы хотите видеть
    их
    в отчете. Щелкните кнопку «Arrow
    Category…», чтобы управлять изображением
    определенных пользователем свойств в
    этом диалоге.

  3. Используйте кнопку
    «Close», чтобы отменить отчет.

Используйте кнопку
«Preview…», чтобы просмотреть отчет
на экране (см. Предосмотр отчета выше).

Используйте кнопку
«Print…», чтобы послать отчет на
выбранный Вами принтер.

Используйте
кнопку «Report…», чтобы создать Ваш
отчет как файл.

Отчет
непротиворечивости модели

Отчет непротиворечивости
модели создает список проблем
последовательности для определенной
модели, включая несвязанные граничные
стрелки, неразрешенные квадратные
туннели, неназванные диаграммы,
неназванные активности, неназванные
стрелки, и т.д.

Чтобы
создать отчет непротиворечивости модели

  1. Выберите опцию
    меню «Model Consistency Report…» из меню
    Report,
    чтобы показать диалог выбора
    опций.

  2. Щелкните на
    выключателях, которые Вы хотите, в том
    порядке, в котором Вы хотите видеть
    их
    в отчете.

  3. Используйте кнопку
    «Close», чтобы отменить отчет.

Используйте кнопку
«Preview…», чтобы просмотреть отчет
на экране (см. Предосмотр отчета
выше).

Используйте кнопку
«Print…», чтобы послать отчет на
выбранный Вами принтер.

Используйте кнопку
«Report…», чтобы создать Ваш отчет
как файл.

Отчет
основанной на активности стоимости

Отчет основанной
на активности стоимости создает отчет
о данных стоимости активности.

Чтобы
создать отчет основанной на активности
стоимости

  1. Выберите опцию
    меню «Activity Cost Report…» из меню Report,
    чтобы показать диалог выбора опций.

  2. Щелкните на
    выключателях, которые Вы хотите, в том
    порядке, в котором Вы хотите видеть
    их в
    отчете.

  3. Используйте кнопку
    «Close», чтобы отменить отчет.

Используйте кнопку
«Preview…», чтобы просмотреть отчет
на экране (см. Предосмотр отчета
выше).

Используйте кнопку
«Print…», чтобы послать отчет на
выбранный Вами принтер.

Используйте кнопку
«Report…», чтобы создать Ваш отчет
как файл.

Отчет
индекса узлов

Иногда полезно
рассмотреть модель в объединенном
формате. Чтобы приспособиться к этому,
BPwin
позволяет Вам создать отчет индекса
узлов. Это отчет может быть создан на
принтер или в файл, подобно любому
другому отчету. BPwin
также поддерживает графическую диаграмму,
называемую деревом узлов (см. главу 3).

Чтобы
создать отчет индекса узлов

  1. Выберите опцию
    меню «Activity Report…» из меню Report,
    чтобы показать диалог выбора опций.

  2. Отмените все выборы
    опций, щелкая на тех, которые показывают
    «X».

  3. Щелкните «Activity
    Number», сопровождаемый «Activity Name».

  4. Выберите опцию
    «Activity Number» для Activity Ordering.

  5. Выберите формат
    отчета «Comma Delimited».

  6. Используйте кнопку
    «Close», чтобы отменить отчет.

Используйте кнопку
«Preview…», чтобы просмотреть отчет
на экране (см. Предосмотр отчета
выше).

Используйте кнопку
«Print…», чтобы послать отчет на
выбранный Вами принтер.

Используйте кнопку
«Report…», чтобы создать Ваш отчет
как файл.

О

Упражнение
8.3

ткройте учебный файл tut8-1.bp1 и создайте
по одному из каждого отчета.

Чтобы
продолжить, перейдите к Главе 9

Это
завершение Главы 8 учебника
BPwin.

Г
л а в а 9

Интеграция
модели BPwin с моделью ERwin

Что
Вы узнаете в этой главе

Эта глава охватит,
как:

  • Создать объекты
    и атрибуты в BPwin

  • Отобразить объекты
    и атрибуты IDEF1X в стрелки IDEFO

  • Определить
    использование данных

  • Импортировать
    словарь ERwin в
    BPwin

  • Экспортировать
    информацию из BPwin в ERwin

Мы проиллюстрируем
некоторые основные концепции, частично
объединяя модель данных ERwin «Movies»
с моделью процесса BPwin «Run Video
Store». Если Вы не имеете ERwin, т
волнуйтесь — мы уже импортировали
файлы словаря ERwin в TUT8-O.BP1 для Вас.
Чтобы начать, откройте файл TUT6-О.ВР1.

Обратитесь к Главе
7 в Руководстве по методам BPwin
для большей информации об интеграции
данных и процесса.

Создание
объектов и атрибутов в BPwin

Вы можете создать
два типа объектов и атрибутов в BPwin
— те которые представляют постоянные
данные — то есть, данные, который будут,
и
те, которые представляют переходные
данные. Постоянные данные моделируются
в модели данных ERwin, так что эти
постоянные объекты и атрибуты будут
наиболее вероятно переданы в ERwin в
некоторый момент. Переходные данные —
это данные, которые перемещаются от
одной активности до другой, но не
сохраняются между активациями активности.

Объекты и атрибуты
могут быть импортированы из существующей
модели данных ERwin или создаваться
непосредственно в BPwin. Чтобы
создать объекты и атрибуты в BPwin,
откройте Entity/Attribute Dictionary из меню Editor.

Рисунок 1
Entity/Attribute Dictionary.

Создание
объектов

Так как объект —
это контейнер для одного или более
атрибутов, необходимо создать объект
перед созданием любых атрибутов.

  1. Напечатайте имя
    объекта. Если объект переходный, щелкните
    выключатель «BPwin only».

Для этого упражнения,
введите имя «MOVIE». Это объект
постоянный (то есть, мы хотим сохранить
информацию о ФИЛЬМЕ), поэтому, не отмечайте
выключатель «BPwin only».

  1. Щелкните кнопку
    «Add» рядом с объектами. Объект MOVIE
    добавлен к модели.

Для этого упражнения,
добавьте второй объект под названием
«MOVIE_COPY».

Создание
атрибутов

  1. Выберите объект,
    к которому Вы желаете добавить атрибут.
    Для этого упражнения, выберите MOVIE.

  2. Напечатайте имя
    атрибута. Если атрибут переходный,
    щелкните выключатель «BPwin only».
    Для этого упражнения, напечатайте
    «movie_name».

Если объект обозначен
как переходный, то все его атрибуты
должны также быть переходными. BPwin
гарантирует это автоматически. Однако,
совершенно разумно иметь переходные
атрибуты как часть постоянного объекта.
Примером такого объекта может быть
sales_total_amount, который, т.к. это сумма затрат
набора пунктов, всегда рассчитывается,
когда необходимо, и поэтому является
переходным.

  1. Щелкните кнопку
    «Add» рядом с атрибутами. Атрибут
    movie_name добавлен к модели.

Обновление
объектов и атрибутов

  1. Выберите объект
    или атрибут, который Вы желаете изменить.

Для этого упражнения,
выберите объект MOVIE и затем выберите
атрибут movie_name.

  1. Напечатайте новое
    имя и/или щелкните выключатель «BPwin
    only», чтобы включить или выключить
    выключатель «ВРwin
    only».

Для этого упражнения,
movie_name — постоянный атрибут, так что мы
не будем отмечать выключатель «BPwin
only». Вместо этого, замените «_»
более естественно смотрящимся пробелом
(» «). Теперь атрибутом будет имя
фильма.

3. Щелкните кнопку
«Update».

Удаление
объектов и атрибутов

  1. Выберите объект
    или атрибут, который Вы хотите удалить.
    Выберите объект MOVIE_COPY.

  2. Щелкните кнопку
    «Delete».

Если Вы удаляете
объект, все атрибуты удаляются.

Экспорт
информации из BPwin в
ERwin

Процесс перемещения
объекта и информации объекта из BPwin в
ERwin
требует три шага. Первый,
экспорт информации из BPwin. Второй,
импорт информации в ERwin. Третий, повторный
импорт информации обратно в BPwin
(который будет модернизировать модель
процесса с важной информацией). Обратите
внимание, что этот последний шаг
автоматически выполняется, когда Вы
открываете модель BPwin и до того, как
Вы перезапишете .ВРХ файл, так что Вы,
вероятно, будете выполнять этот последний
шаг только в необычных обстоятельствах
— например, Вы не закрываете модель
ВРwin
после экспорта в ERwin.

BPwin создает
специальный файл, который может быть
позже импортирован в ERwin.

Создание
файла экспорта (.ВРХ).

  1. Из меню File, выберите
    ERwin I/O и затем Export .ВРХ.

  2. Выберите путь (то
    есть директория, в которой файл будет
    находиться).

  3. Напечатать имя
    файла. Расширение (три буквы, отделенные
    от имени файла «.») должно быть
    «.ВРХ» (Hanp.TUT7-l.BPX)

  4. Щелкните кнопку
    «О К».

Что
находится в экспортном файле

Экспортный файл
содержит все объекты и атрибуты, созданные
в BPwin. которые НЕ обозначены как
«BPwin
only». В ERwin, Вы можете
импортировать эти объекты ч атрибуты
в Вашу модель данных. Эта файл также
содержит все связи между объектами,
атрибутами, стрелками и активностями.
В ERwin, Вы можете выбрать активность
или стрелку выскакивающего списка и
автоматически создать ERwin Subject Are.i
(Область объектов), которая содержит
объекты, связанные с этой активностью
или стрелкой.

Импорт
информации в ERwin

Процедура для
импорта информации BPwin в ERwin описана
в документации ERwin.

Синхронизация
BPwin с
ERwin

Важно обратить
внимание на то, что в течение процесса
импорта, ERwin будет изменять файл
.ВРХ информацией, в которой нуждается
BPwin,
чтобы поддерживать модели
синхронизованными. Как только Вы
импортировали .ВРХ файл в ERwin, Вы
должны переимпортировать .ВРХ файл в
BPwin.
Этот шаг синхронизации происходит
автоматически, когда модель BPwin
открывается, или прежде, чем BPwin
запишет .ВРХ файл.

Чтобы
вручную синхронизировать BPwin с
ERwin

Вы можете вручную
синхронизировать BPwin с
ERwin,
потому что BPwin единожды пытается
автоматически синхронизировать, когда
модель открывается, или Вы пытаетесь
переписать существующий .ВРХ файл.

  1. Откройте .ВРХ файл.
    Из меню File, щелкните ERwin I/O и выберите
    Import .ВРХ.

BPwin будет затем
модернизировать объекты и атрибуты,
предварительно экспортированные в
ERwin.
Эти объекты и атрибуты больше
нельзя редактировать в BPwin — Вы
должны использовать ERwin, чтобы
изменить их.

Что
может пойти неправильно?

Очень немного. В
маловероятном случае, когда Вы
экспортируете .ВРХ файл и импортируете
его в ERwin — но затем импортируете
словарь ERwin обратно в BPwin перед
завершением шага синхронизации, BPwin
будет сначала импортировать .ВРХ файл.

Если Вы экспортируете
объект или атрибут в ERwin, и затем
удаляете его из BPwin, он не будет
удален из ERwin. Фактически, если Вы
когда-нибудь реимпортируете словарь
ERwin, объект или атрибут появится вновь.
Обратите внимание, однако, что когда Вы
удаляете объект или атрибут в BPwin,
все связи со стрелками и активностями
удаляются. Поэтому, если и когда объект
или атрибут возвращается — связи нет.

Импорт
словаря Erwin в Bpwin

Если Вы желаете
попробовать это упражнение, используйте
модель MOVIES. ER1, поставляемую с ERwin.
Создайте словарь в одном из xBase форматов
и продолжите следующее:

Чтобы
импортировать словарь ERwin

  1. Из меню File,
    выберите ERwin I/O и затем Import Dictionary. Или,
    перейдите в Arrow Dictionary и нажмите кнопку
    «Import from ERwin».

  1. Выберите
    соответствующий тип файла словаря.

  2. Выберите
    соответствующий диск и директорию, и
    щелкните кнопку «Import Dictionary».

BPwin даст Вам
знать, когда импорт завершен или если
он потерпит неудачу. Если импорт терпит
неудачу, Вы, скорее всего, указываете
неправильную директорию или выбрали
неправильный тип файла. Просто повторите
процесс с правильными назначениями.

Если Вы предварительно
импортировали словарь ERwin, BPwin

создаст отчет
несоответствия, детализирующий различия
между загруженным в настоящее время
словарем и новым словарем.

Если Вы нажимаете
«QK» и выходите из диалога импорта,
BPwin
совершит импорт.

Если
Вы нажимаете кнопку «Cancel»,
BPwin

отбросит импортированные данные.

Загрузите
TUT7-1.BP1, чтобы увидеть результаты
вышеупомянутого упражнения.

Рисунок 2. Редактор
Bpwin Arrow Dictionary.

Рисунок 3. Диалог
импорта Erwin

Рисунок 4. Диалог
отчета несоответствия.

Отображение
объектов и атрибутов IDEF1X в стрелки IDEF0

Все назначения
выполняются в диалоге Arrow Association Editor. К
этому диалогу, подобно диалогу Bpwin Link
to Erwin Dictionary, обращаются через Arrow
Dictionary. Для этого упражнения, загрузите
TUT7-1.BP1.

Чтобы
открыть редактор Arrow Association

Из редактора Arrow
Dictionary, щелкните кнопку “Entity Arrow Assoc…”.

Рисунок 5. Редактор
Arrow Association

Чтобы
создать назначение между данными

и
стрелкой

  1. Выберите стрелку
    из раскрывающегося списка.

Доступные объекты
показаны в списке Entity внизу диалога.

Для этого упражнения,
выберите Retired Tapes.

  1. Затем выберите
    объекты, чтобы назначить этой стрелке.
    Чтобы выбрать объект, просто щелкните
    на нем; специальный символ «|» будет
    показываться рядом с объектом, чтобы
    указать, что он назначен.

Когда Вы выберите
объект, его атрибуты появятся в списке
атрибутов.

Для этого упражнения,
выберите MOVIE-COPY.

  1. Чтобы выбрать
    атрибут, просто щелкните на нем. Атрибут
    появится в негативном изображении,
    когда выбран. Чтобы отменить выбор
    объекта или атрибута, просто щелкните
    на нем.

Для этого упражнения,
выберите любой из атрибутов MOVIE-COPY.
Попробуйте выбрать и отменить их выбор,
чтобы увидеть выделение в действии.

  1. Теперь назначьте
    MOVIE-COPY к Damaged Tapes.

  2. Назначьте все
    атрибуты MOVIE-COPY к Damaged Tapes.

  3. Теперь назначьте:

MOVIE к New Tapes

movie-number и
movie-name к New Tapes

MOVIE к Customer Requests

MOVIE-RENTAL-RECORD к Rental
Income

MOVIE-RENTAL-RECORD к Rented
Tapes

CUSTOMER к Customer Requests

все атрибуты
CUSTOMER к Customer Requests.

  1. Щелкните «OK»,
    чтобы выйти из диалога.

Использование
данных

Каждое сопряжение
между стрелкой и активностью представляет
объекты, используемые или созданные
этой определенной активностью. Для
данных, это касается объектов и атрибутов.
Точнее, мы касаемся экземпляров
объектов и атрибутов, причем экземпляр
является отдельным вхождением типа
объекта, в то время как тип объекта
(обычно упоминаемый просто как объект)
представляет собрание, или набор,
вхождений. Пример типа объекта — CUSTOMER
(Заказчик). Пример вхождения объекта
(экземпляр CUSTOMER) — «John Smith.»

Чтобы
определить использование

  1. Выберите опцию
    меню «Activity Assoc» из меню Editor. Вы
    можете также получить доступ к нему,
    используя меню правой кнопки мыши при
    указании на активность.

  2. Выберите желаемую
    активность, если необходимо. Для этого
    упражнения, выберите «ACQUIRE TAPES».
    Все связанные стрелки появляются в
    списке стрелок.

  3. Выберите стрелку,
    и ее связанные объекты и атрибуты
    появятся в списке внизу.

Для этого упражнения,
выберите «Customer Requests».

  1. Выберите объект
    и определите его использование (CRUD).
    Для этого упражнения, выберите «CUSTOMER»
    и определите «R» — для чтения.

  2. Чтобы определить
    использование объекта, выберите атрибут.
    Вы заметите, что выключатели CRUD изменились
    в IRUN соответствующие использования
    для атрибутов. Определите желаемое
    использование объекта. Так как Вы уже
    выбрали CUSTOMER, назначьте его атрибуты:
    выберите customer-number и определите «R»
    для чтения. выберите customer-name и
    определите «R» для чтения. Вы можете
    повторить этот процесс для остающихся
    атрибутов для этого объекта, или выбрать
    другой объект и • продолжить.

  3. Когда Вы закончите,
    нажмите кнопку «QK», чтобы выйти из
    диалога.

Рисунок 6. Редактор
Activity Assotiation.

Отчет
использования данных

Отчет использования
данных обеспечивает информацию о том,
какие данные используются активностью,
и как эти данные используются. Чтобы
создать этот отчет, Вы должны пройти
шаги импортирования информации модели
данных, соединения данных со стрелками,
и соединения стрелок с активностями.

Чтобы
создать отчет использования данных

  1. Выберите опцию
    меню «Data Usage Report…» из меню Report, чтобы
    показать диалог выбора опций.

  2. Щелкните на
    выключателях, которые Вы хотите, в том
    порядке, в котором Вы хотите видеть их
    в отчете.

  3. Используйте кнопку
    «Close», чтобы отменить отчет.

Используйте кнопку
«Preview…», чтобы посмотреть отчет на
экране (см. Предосмотр отчета выше).

Используйте кнопку
«Print…», чтобы послать отчет на выбранный
Вами принтер.

Используйте кнопку
«Report…», чтобы создать Ваш отчет как
файл.

Если необходимо,
просмотрите главу 8 Печать диаграмм
и отчетов
для дополнительной информации
о печати отчетов.

Поздравления!
Это завершение учебника
Bpwin.

2

BP1 является отрицательным модулятором дефинитивного эритропоэза

Экспрессия BP1

in vivo , по-видимому, является эмбриональной летальностью

Характеристика in vivo Роль BP1 в эритроидных клетках была проведена путем введения конструкции LCRBP1 мышам. LCRBP1 был получен путем связывания регуляторных последовательностей человеческого β-глобина без двух сайленсерных областей BP1 с кДНК BP1 человека (). Только одна взрослая трансгенная мышь-основатель с интактным трансгеном была получена из 121 мыши (P28 in).Эта самка мыши-основателя, по-видимому, имела одну копию трансгена и была интенсивно скрещена с мышами F1 дикого типа (C57Bl / 6J X CBA / J). Из 11 пометов все 76 мышей оказались отрицательными по трансгену. Средний размер помета составлял 7 детенышей, что значительно меньше 10–12 детенышей в среднем для этих линий. Отсутствие передачи можно объяснить высокой мозаичностью и / или эмбриональной летальностью в результате экспрессии трансгена BP1. Полученная очень низкая частота взрослых трансгенных мышей по сравнению с частотой ~ 10-15% для других трансгенов (данные не показаны), также указывает на то, что экспрессия BP1 в дифференцирующихся и зрелых эритроидных клетках может быть летальной во время беременности.Чтобы проверить эту гипотезу, была проведена микроинъекция дополнительных ооцитов конструкции LCRBP1, а плоды были проанализированы на наличие трансгена на различных стадиях беременности. Как показано на фиг.1, один из двух эмбрионов на ст. E15.5 и четыре из 27 эмбрионов на ст. Ст. E16.5 были LCRBP1-положительными. Среди этих четырех трансгенных плодов один резорбировался, а другой был бледным (анемичным). После этого частота трансгенных плодов снизилась. Поскольку максимальная экспрессия эндогенного гена глобина взрослой мыши происходит на E16.5 для дефинитивных эритроидных клеток, можно было бы ожидать, что репрессия с помощью BP1 будет наиболее пагубной, начиная с этой стадии и далее.

Структура и экспрессия трансгена LCRBP1 у трансгенных мышей. ( a ) Конструкция LCRBP1 была получена в векторе bluescript путем присоединения промотора человеческого β-глобина (pr), лишенного двух сайленсерных последовательностей (от -264 / SnaB1 до + 48 / NcoI), к кДНК BP1 размером 1,1 т.п.н. (SmaI– XbaI). Человеческий β-глобин 8 kb midi LCR был связан с этой ДНК выше и ниже по течению 2.8 т.п.н. гена β-глобина, включая 3′-последовательности экзона 2, весь экзон 3 и 3′-фланкирующие последовательности [от BamHI (нуклеотид 62613) до XbaI (нуклеотид 65421), номер доступа в GenBank. {«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «U01317», «term_id»: «455025», «term_text»: «U01317»}} U01317), содержащий два глобина 3 ′ энхансеры (18). Зонд BP1-β-глобин (SnaBI-XbaI, 3,2 т.п.н.), используемый для скрининга трансгенных мышей с помощью саузерн-блоттинга, указан над конструкцией LCRBP1. ( b ) Анализ экспрессии в периферической крови с использованием ОТ-ПЦР.Три образца крови с РНК из контрольной H 2 O (C), трансгенной мыши (tg BP1) и контрольной идентичной линии мышей (WT) отслеживали на экспрессию BP1 и S16. Экспрессия человеческого ВР1 легко обнаруживалась в крови трансгенной мыши-основателя и не определялась в крови контрольной идентичной линии мышей. Экспрессия рибосомного белка S16 служила внутренним контролем.

Таблица 1

Анализ генотипа плодов / детенышей из ооцитов с микроинъекцией LCRBP1

Стадия (возраст) Всего n (плодов или детенышей) BP1 Генотип
+
E15.5 2 1 1
E16.5 27 23 4 a
E17.5 41 40 1
E18 .5 39 38 1 b
P28 121 120 1 c

Единственная взрослая трансгенная женщина-основатель экспрессировала ВР1 в периферической крови, как показано ОТ-ПЦР и защита от РНКазы (и данные не показаны).Патологический анализ после неожиданной смерти этой трансгенной мыши-основателя показал увеличение селезенки примерно в 2 раза по сравнению с контрольной линией мышей соответствующего возраста. Клеточность костного мозга увеличилась в 1,8 раза в бедренной кости мыши-основателя (8,4 × 10 7 клеток) по сравнению с контролем (4,6 × 10 7 ± 0,9 клеток; n = 4), что согласуется с ~ 1,4-кратное увеличение клеточности, наблюдаемое у гемизиготных мышей с нокаутом β-глобина, модели β-талассемии (15).Обе эти особенности указывают на стимулирование кроветворения и согласуются с наблюдением многочисленных очагов экстрамедуллярного кроветворения в таких органах, как селезенка и почки. В то время как в почечных тканях были нормальные канальцы, интерстиций и кровеносные сосуды, в клубочках наблюдалось расширение мезангиума по сравнению с контролем (), с сужением капилляров из-за больших отложений положительного конго красного амилоида (). Путем специфического окрашивания для идентификации белков-предшественников амилоида эти отложения амилоида были отрицательными для иммуноглобулинов, каппа- и лямбда-легких цепей, но положительными для SAA ().Электронная микроскопия выявила клубочковые отложения из случайно ориентированных фибрилл размером 8–10 нм, типичных для амилоида (). Наличие повышенной SAA наблюдается в условиях хронического воспаления, как при талассемии (16). Совокупность этих патологических находок, увеличение эритропоэза / гематопоэза и отложения амилоида, согласуется с талассемическим состоянием у трансгенных мышей BP1.

Гистопатологический анализ трансгенной мыши-основателя LCRBP1. ( a ) Нормальная гистология почки с небольшими регулярными клубочками и окружающим тубулоинтерстициальным отсеком (H&E, × 100).На вставке показаны клубочки нормального размера и клеточности с открытыми капиллярами и базальными мембранами нормальной толщины (H&E, × 400). ( b ) Гистология почек трансгенной мыши LCRBP1 показала диффузное и равномерное увеличение клубочков из-за расширения клубочкового пучка аморфным бледным эозинофильным материалом. Внешние канальцы, интерстиций и кровеносные сосуды не вовлечены (H&E, × 100). На вставке показан типичный клубок трансгенной мыши LCRBP1 с расширением мезангиума и сужением просвета капилляров клубочков объемными отложениями аморфного материала, типичного для амилоида.Клеточность клубочков оказалась сниженной (H&E, × 400). ( c ) Почка трансгенной мыши LCRBP1, рассматриваемая в поляризованном свете, показывала двойное лучепреломление яблочно-зеленого цвета, что является диагностическим признаком амилоидных отложений в диффузном и глобальном клубочковом распределении (конго красный, поляризованный свет, × 100). ( d ) Почка трансгенной мыши LCRBP1 показала сильную диффузную и глобальную клубочковую положительную реакцию на сывороточный амилоидный белок (иммуноокрашивание SAA, × 250). ( и ) Ультраструктурный анализ нормального почечного клубочкового капилляра показал нормальную клубочковую архитектуру без фибриллярных отложений (EM, × 6000).( f ) Ультраструктура почечного клубочка трансгенной мыши LCRBP1 показала множество произвольно ориентированных фибрилл 8-10 нм, расширяющих мезангиальные области и сужающих прилегающий просвет капилляров клубочка (EM, × 6000). На вставке показаны фибриллы с большей величиной (EM, × 20 000).

Экспрессия ВР1 нарушает дефинитивный эритропоэз

Для более глубокого понимания роли ВР1 in vivo в примитивном и дефинитивном гематопоэзе, LCRBP1 и конструкции LCRΔBP1, управляющие пустым вектором, были нацелены на тотипотентные ES-клетки путем совместной электропорации с вектором pSV. .Для обеих конструкций было получено несколько независимых клонов, которые были проанализированы с помощью саузерн-блоттинга на целостность трансгенов (). Среди клонов с интактным трансгеном для последующего анализа были отобраны три клона для LCRBP1 (1, 2 и 5 копий трансгена) и три клона для LCRΔBP1 (1 и 2 копии).

Целостность трансгена BP1 в ES-клетках. Саузерн-блот-анализ электропорированных ES-клеток с конструкциями LCRΔBP1 и LCRBP1. Расщепление рестрикционным ферментом проводили для клонов LCRΔBP1 и LCRBP1 с использованием SalI / BamHI.Используемый зонд изображен и охватывает последовательности взрослого β-глобина и ВР1. Ожидаемые фрагменты составляют 6,1 и 2,8 т.п.н. для клонов LCRΔBP1 и 7,2 и 2,8 т.п.н. для клонов LCRBP1. Интенсивность полосы 6,1 т.п.н. клонов LCRΔBP1 слабее, чем 2,8 т.п.н. или 7,2 т.п.н. клонов LCRBP1, поскольку только ~ 0,3 т.п.н. зонда гомологичен глобину. Дополнительные полосы соответствуют стыку конструкций с геномными последовательностями. M, маркер молекулярной массы λ, расщепленный HindIII и C, копия единицы длины LCRBP1.

Родительские и электропорированные ES-клетки были дифференцированы in vitro с образованием EB (которые содержат различные типы клеток) и оценены на экспрессию BP1. Потенциал этих электропорированных ES-клеток генерировать EB существенно не изменился, поскольку эффективность первичного посева составила 17,5 ± 3,9% для родительских ES-клеток, 17,1 ± 4,3% для клеток LCRΔBP1 и 14,1 ± 3,5% для клеток LCRBP1 (среднее значение ± стандартное отклонение). . Кроме того, электропорированные ES-клетки LCRBP1 давали EB того же размера, что и исходные и пустые векторные ES-клетки (данные не показаны), что позволяет предположить, что количество клеток на EB не изменилось.Во время этого процесса первичной дифференцировки процент гемоглобинизированных EB был сопоставим между родительскими и электропорированными клетками на 9 день (). Для количественной оценки уровней экспрессии мы сначала установили, что условия ОТ-ПЦР находятся в пределах линейного диапазона (). Динамика экспрессии эндогенного взрослого гена β-глобина была сходной для контроля дикого типа и пустого вектора (и данные не показаны). Примечательно, что ES-клетки или EB дикого типа с пустым контролем LCRΔBP1 не экспрессировали BP1 (). В двух независимых экспериментах экспрессия BP1 в клонах LCRBP1 была максимальной на 6 и 9 день и снижалась с 12 дня и далее, тогда как ген β-глобина демонстрировал самую сильную экспрессию на 12 и 15 дни.Полуколичественный анализ клонов LCRBP1 показал ~ 1,5-2-кратное снижение экспрессии β-глобина, нормализованной до S16, на 12 и 15 дни по сравнению с контролем с пустым вектором. Соответственно, количественная оценка EBs с помощью ПЦР в реальном времени на 9-й день показала снижение уровней экспрессии β-глобина по крайней мере в 4 раза, время, когда BP1 является самым сильным (и). Следовательно, клоны LCRBP1 показали, что BP1 может противодействовать экспрессии мышиного гена β-глобина. Напротив, репрессия BP1 в эритролейкозной клеточной линии K562, как было показано, усиливает экспрессию эндогенного гена β-глобина человека (3).

Анализ экспрессии генов BP1 и β-глобина в EB на различных стадиях первичной дифференцировки. ( a ) Демонстрация линейности амплификации ОТ-ПЦР. Различные количества аликвот общей кДНК амплифицировали с праймерами, специфичными для BP1, β-глобина и S16, в качестве внутреннего контроля, чтобы гарантировать, что условия находятся в пределах линейного диапазона амплификации. Реакции оценивали полуколичественно на полиакриламидных гелях, сканированных фосфоимиджером, и значения наносили на линейные графики.(b ) Родительские ES-клетки (WT), ES-клетки, содержащие пустой вектор (LCRΔBP1), или ES-клетки, содержащие BP1 (LCRBP1), дифференцировали в эмбриоидные тельца (EB). Анализ экспрессии ВР1 и эндогенного гена β-глобина проводили с помощью ОТ-ПЦР в указанные дни дифференцировки, используя экспрессию S16 в качестве внутреннего контроля. Указанные дни были выбраны для анализа кинетики дифференцировки эритроидов, поскольку первичная экспрессия эритроидов максимальна на 7-й день, а окончательная экспрессия эритроидного клона высока с 5-го по 12-й день (11).Полуколичественную оценку выполняли для каждого прогона образца на одном и том же геле и нормализовали к контролю рибосомной РНК.

Таблица 2

Количественная оценка предшественников эритроидов

75

EB d9% Hb EB / общее количество EB E p d3 No. E p /10 5 клеток E d d7% E d / всего колоний
WT 53,97 ± 1,45 0.17 ± 0,01 27,00 ± 0,50
LCRΔBP1 53,49 ± 3,39 0,18 ± 0,01 25,00 ± 0,35
LCRBP1-1 55,48 ± 8,77 0,17 ± 0,02 17,16 ± 1,46 ± 1,45 *, ***
LCRBP1-2 54,00 ± 2,82 0,19 ± 0,00 17,50 ± 0,00 **, ***
LCRBP1-3 51,35 ± 3,32 0,15 ± 0,02 17.66 ± 0,76 **, ***

Таблица 3

Количественная экспрессия генов BP1 и β-глобина взрослых в предшественниках эритроидов

EBs d9 E p d3 E d d7



BP1 / S16 β-глобин (10 −3 ) / S16 BP1 / S16 β -глобин / S16 BP1 / S16 β-глобин / S16
WT N.D. 28 ± 2,6 0,03 ± 0,0 10,0 ± 2,2 ND 300,5 ± 7,3
LCRΔBP1 ND 14 ± 8,5 0,05 ± 0,0 10,3 ± 1,5 НД 250,4 ± 4,2
LCRBP1-1 2,7 ± 0,6 2 ± 0,6 * 73,8 ± 1,7 3,9 ± 0,3 ** 60,0 ± 2,8 150,3 ± 14,7 **
LCRBP1-2 25.4 ± 4,5 3 ± 0,4 * 672,4 ± 19,4 5,1 ± 1,9 * 702,3 ± 99,5 225,9 ± 19,2 *
LCRBP1-3 5,2 ± 1,8 1 ± 0,1 * 126,3 ± 2,0 7,5 ± 2,1 * 117,7 ± 22,0 180,8 ± 24,5 *

Для более точного исследования роли ВР1 мы провели вторичная дифференцировка в условиях, благоприятных для эритроидных / гемопоэтических колониеобразующих клеток (CFC).В четырех сериях экспериментов количество примитивных предшественников эритроида E p , обнаруженных на 3-й день, не изменилось при дифференцировке родительских, LCRBP1 и контрольных LCRΔBP1 ES клеток (). Количественный анализ экспрессии из пулов LCRBP1 E p , нормализованных до S16, показал значительное увеличение уровней экспрессии BP1 (от ~ 20 до 25 раз) по сравнению с пулами EB LCRBP1 (). Как показано на фиг.4, это увеличение экспрессии BP1, по-видимому, не оказывает значительного отрицательного эффекта на продукцию примитивных эритроидных клеток.Однако количество дефинитивного эритроид-CFC (E d -CFC) на 7 день, как идентифицировано гемоглобинизированными колониями, было значительно снижено в LCRBP1 по сравнению с пустым вектором и родительскими ES-клетками. Пулы отдельных гемоглобинизированных предшественников дефинитивного эритроида E d LCRBP1 показали высокие уровни экспрессии BP1, аналогичные тем, которые наблюдались для примитивных предшественников эритроидного эритроида E p LCRBP1 с помощью ПЦР в реальном времени (). Эти результаты показали, что повышенная экспрессия BP1 приводит к специфическому снижению дефинитивного эритропоэза по сравнению с примитивным эритропоэзом.Важно отметить, что экспрессия BP1 вызвала значительное снижение экспрессии гена β-глобина взрослых как для клеток E p , так и для клеток E d по сравнению с контролем дикого типа и пустым вектором, достигая 2–2,5 раз (). В отличие от дефинитивного эритропоэза, β-глобиновая цепь взрослых не является наиболее распространенной β-подобной глобиновой цепью в примитивном эритропоэзе, и, соответственно, снижение экспрессии не оказывает видимого влияния на примитивную дифференцировку. Следует отметить, что пулы гемоглобинизированных предшественников LCRBP1 E d были выбраны для анализа экспрессии, поскольку негемоглобинизированные колонии включают другие типы клеток.Однако можно ожидать, что объединение гемоглобинизированных E d приведет к отбору более высоких уровней β-глобина, возможно, смещая данные в сторону меньшей репрессии. Таким образом, фактическое снижение уровня β-глобина может быть намного больше, чем наблюдаемое. Тем не менее, такое снижение экспрессии, вероятно, будет иметь важное значение для мышей, поскольку мыши с гемизиготным нокаутом β-глобина только с 25% снижением экспрессии гена β-глобина приводили к тяжелому фенотипу β-талассемии с вдвое ниже уровень гемоглобина и гематокрита (15,17).Кроме того, экспрессия BP1 существенно не изменяла количество mac-CFC (макрофагов), mix-CFC (смешанные линии: эритроид / гранулоцит / макрофаг / мегакариоцит) или E d / mac-CFC (данные не показаны). Следовательно, экспрессия BP1 в эритроидном клоне специфически нацелена на дефинитивные предшественники эритроидов.

Таким образом, наши результаты демонстрируют, что высокая экспрессия BP1 приводит к снижению экспрессии гена β-глобина у взрослых и ингибированию дефинитивной дифференцировки эритроидов.В совокупности предыдущие исследования in vitro и данные, представленные здесь, подтверждают концепцию, согласно которой поддержание экспрессии ВР1 за счет репрессии гена β-глобина взрослого человека может вызывать дисбаланс глобиновой цепи, приводящий к талассемии. Дальнейшие исследования должны быть направлены на определение роли BP1 в талассемии человека.

BP1, новый ген гомеобокса, часто экспрессируется при острых лейкозах.

  • 1

    Chase MB, Haga S, Fu S, Davenport G, Morgan D, Mah A, Berg PE. BP1, новый ген гомеобокса с репрессорной активностью, подавляет дифференцировку эритроидов (представлено)

  • 2

    Levine M, Hoey T.Белки гомеобокса как факторы транскрипции, специфичные для последовательности Клетка 1988 55 : 537–540

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 3

    Лоуренс Х.Дж., Соважо Г., Хамфрис Р.К., Ларгман К. Роль гомеобоксов HOX в нормальном и лейкозном кроветворении Стволовые клетки 1996 14 : 281–291

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 4

    ван Оствен Дж. У., Биджи Дж. Дж., Раапхорст Ф. М., Валбонерс Дж. Дж. М., Мейер CJLM.Роль генов гомеобокса в нормальном кроветворении и гематологических злокачественных новообразованиях Лейкемия 1999 13 : 1675–1690

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 5

    Посмотрите AT. Онкогенные факторы транскрипции при острых лейкозах человека Science 1997 278 : 1059–1064

    CAS

    Google ученый

  • 6

    Лу Кью, Райт Д.Д., Кампс М.П.Слияние с E2A превращает гомеодоменный белок Pbx1 в конститутивный активатор транскрипции лейкозов человека, несущий транслокацию t (1; 19) Mol Cell Biol 1994 14 : 3938–3948

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 7

    Borrow J, Shearman AM, Stanton VP Jr, Becher R, Collins T., Williams AJ, Dube I, Katz F, Kwong YL, Morris C, Ohyashiki K, Toyama K, Rowley J, Housman DE. Транслокация t (7; 11) (p15; p15) при остром миелоидном лейкозе объединяет гены нуклеопорина NUP98 и гомеопротеина I класса HOXA9 Nat Genet 1996 12 : 159–167

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 8

    Накамура Т., Ямадзаки Ю., Хатано Ю., Миура И.NUP98 слит с геном гомеобокса PMX1 при остром миелогенном лейкозе человека с транслокацией хромосом t (1; 11) (q23; p15) Кровь 1999 94 : 741–747

    CAS

    Google ученый

  • 9

    Petrini M, Quaranta MT, Testa U, Samoggia P, Tritarelli E, Care A, Cianetti L, Valtieri M, Barletta C, Peschle C. Экспрессия выбранных генов HOX человека при остром лимфоидном лейкозе B / T и естественных лимфоцитах-киллерах, стимулированных интерлейкином-2 / интерлейкином-1 b Кровь 1992 80 : 185–193

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 10

    Hawley RG, Fong AZC, Reis MD Zhang N, Lu M, Hawley TS.Трансформирующая функция гена гомеобокса HOX11 / TCL3 Cancer Res 1997 57 : 337–345

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 11

    Thorsteinsdottir U, Sauvageau G, Hough MR, Dragowska W, Lansdorp PM, Lawrence HJ, Largman C, Humphries RK. Сверхэкспрессия HOXA10 в гемопоэтических клетках мыши нарушает миелоидную и лимфоидную дифференцировку и приводит к острому миелоидному лейкозу Mol Cell Biol 1997 17 : 495–505

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 12

    Nakamura S, Stock DW, Wydner KL, Bollekens JA, Takeshita K, Nagai BM, Chiba, Kitamura T, Freeland TM, Zhao Z, Minowada J, Lawrence JB, Weiss KB, Ruddle FH.Геномный анализ нового гена Distal-less у млекопитающих: Dlx-7 Genomics 1996 38 : 314–324

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 13

    Куинн Л.М., Джонсон Б.В., Николл Дж., Сазерленд Г.Р., Калионис Б. Выделение и идентификация генов гомеобокса из плаценты человека, включая нового члена семейства Distal -less, DLX4 Gene 1997 187 : 55–61

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 14

    Прайс JA, Bowden DW, Wright JT, Pettenati MJ, Hart TC.Идентификация мутации в DLX3, связанной с трихо-денто-костной тканью (TDO) Hum Mol Gen 1998 7 : 563–569

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 15

    Fu S, Strovel JW, Haga SB, Stamberg J, Berg PE. Картирование нового гена гомеобокса, BP1, рядом с его изоформой DLX7 и характеристика их роли в репрессии гена бета-глобина Am J Hum Gen 1998 63 : A181

    Статья

    Google ученый

  • 16

    Pui C-H.Детские лейкемии New Engl J Med 1995 332 : 1618–1630

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 17

    Karp JE. Острый лейкоз: механизмы выживания клеток как мишени для терапии Int J Oncol 1997 11 : 657–674

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 18

    Copelan EA, McGuire EA. Биология и лечение острого лимфобластного лейкоза у взрослых Кровь 1995 85 : 1151–1168

    CAS

    Google ученый

  • 19

    Tenen DG, Hromas R, Licht JD, Zhang D.E.Факторы транскрипции, нормальное миелоидное развитие и лейкемия Кровь 1997 90 : 489–491

    CAS

    Google ученый

  • 20

    Гевиртц AM, Калабретта Б. Антисмысловой олигодезоксинуклеотид c-myb ингибирует нормальный гемопоэз человека in vitro Science 1988 242 : 1303–1306

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 21

    Guerrasio A, Saglio G, Rosso C, Alfarano A, Camaschella C, Lo Coco F, Biondi A, Ranbaldi A, Nicolis S, Ottolenghi S.Экспрессия мРНК GATA-1 в клетках миелоидного лейкоза человека Лейкемия 1994 8 : 1034–1038

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 22

    Crotta S, Nicolis S, Ronchi A, Ottolenghi S, Ruzzi L, Shimada Y, Migliaccio AR. Прогрессирующая инактивация экспрессии транскрипционного фактора эритроидов в GM- и G-CSF-зависимых линиях миелоидных клеток Nucleic Acids Res 1990 18 : 6863–6869

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 23

    Гонда Т., Меткалф Д.Экспрессия протоонкогенов myb , myc и fos во время дифференцировки мышиного миелоидного лейкоза Nature 1984 310 : 249–251

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 24

    Luscher B, Eisenman RN. Новый взгляд на Myc и Myb. Часть II. Myb Genes Dev 1990 4 : 2235–2241

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 25

    Рафф Т., ван дер Гит М., Эндеманн Д., Видерхольт Т., Пауль М.Разработка и тестирование праймеров для β-актина для ОТ-ПЦР, которые не коамплифицируют процессированные псевдогены BioTechniques 1997 23 : 456–460

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 26

    Majello B, Kenyon LC, Далла-Фавера Р. Человеческий протоонкоген c-myb : нуклеотидная последовательность кДНК и организация геномного локуса Proc Natl Acad Sci USA 1986 83 : 9636–9640

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 27

    Симамото Т., Накамура С., Боллекенс Дж., Раддл Ф.Х., Такешита К.Ингибирование гена гомеобокса Dlx-7 вызывает снижение экспрессии генов GATA-1 и c-myc и апоптоз Proc Natl Acad Sci USA 1997 94 : 3245–3249

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 28

    Цай С.Ф., Мартин Д.ИК, Зон Л.И., Д’Андреа А.Д., Вонг Г.Г., Оркин Ш. Клонирование кДНК основного ДНК-связывающего белка эритроидного происхождения посредством экспрессии в клетках млекопитающих Nature 1989 339 : 446–451

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 29

    Chen Q, Cheng J-T, Tsai L-H, Schneider N, Buchanan G, Carroll A, Crist W, Ozanne B, Siciliano MJ, Baer R.Ген tal подвергается хромосомной транслокации при Т-клеточном лейкозе и потенциально кодирует белок спираль-петля-спираль EMBO J 1990 9 : 415–424

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 30

    Беннетт Дж. М., Катовски Д., Дэниел М. Т., Фландрин Дж., Гальтон Д.А.Г., Гралник Х.Р., Султан С. Предлагаемые пересмотренные критерии классификации французско-американо-британской кооперативной группы Ann Intern Med 1985 103 : 620–625

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 31

    Баер М.Р., Стюарт С.К., Лоуренс Д., Артур, округ Колумбия, Мрозек К., Страут депутат, Дэйви Ф.Р., Шиффер, Калифорния, Блумфилд, компакт-диск.Острый миелоидный лейкоз с транслокациями 11q23: иммунофенотип миеломоноцитов по данным многопараметрической проточной цитометрии Лейкемия 1998 12 : 317–325

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 32

    Таки Т., Охниши Х., Шинохара К., Сако М., Бесшо Ф., Янагисава М., Хаяси Ю. AF17q25, предполагаемый ген семейства септинов, объединяет ген MLL при остром миелоидном лейкозе с t (11; 17) (q23; q25) Cancer Res 1999 59 : 4261–4265

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 33

    Osaka M, Rowley JD, Zeleznik-Le NJ.MSF (MLL septin-like fusion), ген-партнер MLL по слиянию при остром миелоидном лейкозе, связанном с терапией, с at (11; 17) (q23; q25) Proc Natl Acad Sci USA 1999 96 : 6428– 6433

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 34

    Yu BD, Hess JL, Horning SE, Brown GAJ, Korsmeyer S. Измененная экспрессия Hox и сегментарная идентичность у мутантных по Mll мышей Nature 1995 378 : 505–508

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 35

    Вольф Л., Коллер Р., Бис Дж., Назаров В., Хоффман Б., Аманулла А., Кралл М., Мок Б.Ретровирусный инсерционный мутагенез при промоноцитарных лейкозах мышей: c- myb и Mml 1 Curr Top Microbiol Immunol 1996 211 : 191–199

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 36

    Симеоне А., Акампора Д., Паннесе М., Д’Эспозито М., Сторнаюоло А., Гулисано М., Малламачи А., Кастури К., Друк Т., Хюбнер К. Клонирование и характеристика двух членов семейства генов Dlx позвоночных Proc Natl Acad Sci USA 1994 91 : 2250–2254

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 37

    Шен В.Ф., Ларгман К., Лоуни П., Коррал Дж. К., Детмер К., Хаузер, Калифорния, Саймонитч Т.А., Хак FM, Лоуренс Х.Дж.Ограниченная по клонам экспрессия гомеобокс-содержащих генов в линиях гемопоэтических клеток человека Proc Natl Acad Sci USA 1989 86 : 8536–8540

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 38

    Magli CM, Barba, P, Celetti A, De Vita G, Cillo, C, Boncinelli E. Координированная регуляция генов HOX в гемопоэтических клетках человека Proc Natl Acad Sci USA 1991 88 : 6348–6352

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 39

    Мэтьюз ЧЕ, Детмер К., Бончинелли Э., Лоуренс Х.Дж., Ларгман К.Ограниченная эритроидом экспрессия генов гомеобокса человеческого локуса HOX2 Кровь 1991 78 : 2248–2252

    CAS
    PubMed
    PubMed Central

    Google ученый

  • 40

    Celetti A, Barba P, Cillo C, Rotoli B, Boncinelli E, Magli MC. Характерные паттерны экспрессии гена HOX при различных типах лейкемии человека Int J Cancer 1993 53 : 237–244

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 41

    Лоуренс Х.Дж., Соважо Г., Ахмади Н., Лопес А.Р., Лебо М.М., Линк М., Хамфрис К., Ларгман К.Специфическая для стадии и клонов экспрессия гена гомеобокса HOXA10 в нормальных и лейкозных гемопоэтических клетках Exp Hematol 1995 23 : 1160–1166

    CAS
    PubMed
    PubMed Central

    Google ученый

  • 42

    Биджи Дж. Дж., Ван Оствен Дж. В., Walboomers JMM, Бринк ATP, Вос В, Оссенкоппеле Дж. Дж., Мейер CJLM. Дифференциация и ограниченная клеточным типом экспрессия HOXC4, HOXC5 и HOXC6 при миелоидных лейкозах и нормальных миелоидных клетках Лейкоз 1998 12 : 1724–1732

    Статья

    Google ученый

  • 43

    Кавагое Х, Хамфрис РК, Блэр А, Сазерленд Х. Дж., Хогге, Делавэр.Экспрессия генов HOX, кофакторов HOX и MLL в фенотипически и функционально определенных субпопуляциях лейкозных и нормальных гемопоэтических клеток человека Лейкемия 1999 13 : 687–698

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 44

    Salvati PD, Ranford PR, Ford J, Kees UR. Экспрессия HOX11 при остром лимфобластном лейкозе у детей связана с Т-клеточным фенотипом Онкоген 1995 11 : 1333–1338

    CAS

    Google ученый

  • 45

    Cuneo A, Mecucci C, Kerim S, Vandenberghe E, Dal Cin P, Van Orshoven A, Rodhain J, Bosly A, Michaux JL, Martiat P, Boogaerts M, Carli MG, Castoldi G, Van Den Berghe H .Вовлечение мультипотентных стволовых клеток в мегакариобластный лейкоз: цитологические и цитогенетические данные у 15 пациентов Кровь 1989 74 : 1781–1790

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 46

    Bonnet D, Dick JE. Острый лейкоз человека организован в виде иерархии, которая происходит от примитивной гемопоэтической клетки Nature Med 1997 3 : 730–737

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 47

    Venditti A, Del Poeta G, Buccisano F, Tamburini A, Cox MC, Stasi R, Bruno A, Aronica G, Maffei L, Suppo G, Simone MD, Forte L, Cordero V, Postorino M, Tufilli V , Isacchi G, Masi M, Papa G, Amadori S.Минимально дифференцированный острый миелоидный лейкоз (AML-M0): сравнение 25 случаев с другими французско-американско-британскими подтипами Кровь 1997 89 : 621–629

    CAS

    Google ученый

  • 48

    Sauvageau G, Lansdorp PM, Eaves CJ, Hogge DE, Dragowska WH, Reid DS, Largman C, Lawreence J, Humphries RK. Дифференциальная экспрессия генов гомеобокса в функционально различных субпопуляциях CD34 + клеток костного мозга человека Proc Natl Acad Sci USA 1994 91 : 12223–12227

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 49

    Бхатия М., Боннет Д., Мердок Б., Ган О.И., Дик Дж.Недавно открытый класс человеческих гемопоэтических клеток с SCID-репопуляционной активностью Nature Med 1998 4 : 1038–1045

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 50

    Гуделл Массачусетс. CD34 + или CD34-: действительно ли это важно? Кровь 1999 94 : 2545–2547

    CAS

    Google ученый

  • 51

    Сато Т., Лавер Дж. Х., Огава М. Обратимая экспрессия CD34 кроветворными стволовыми клетками мыши Кровь 1999 94 : 2548–2554

    CAS

    Google ученый

  • CyManII RFP-BP1 Период подачи заявок открыт для 3 тем проекта — Национальный центр производственных наук

    Институт инноваций в производстве кибербезопасности (CyManII) объявил о продлении срока подачи предложений по проекту RFP-BP1, включающих три технические темы проекта:

    • 1 Базовый план
    • 4 Скоординированная осведомленность об уязвимостях
    • 5 TrustWorks-aaS

    Срок сдачи нового предложения — 11 июня 2021 г., в 5 p.м. CDT. Полное описание трех тематических областей можно найти в полном RFP, размещенном здесь: https://cymanii.org/rfp/.

    Краткое изложение общих технических тематических областей, по которым запрашиваются предложения, перечислены ниже. Конкретные детали технических тем, запрошенных в RFP, будут более узкими по объему и больше ориентированы на конкретные технические результаты, чем в кратких описаниях ниже.

    2.1 Базовый анализ (Cybersecure Energy Quantification — CEQ):
    CyManII использует совместный подход к базовым приоритетам, чтобы гарантировать, что они основаны на показателях производительности отрасли и образуют количественную основу для оценки прогресса.Предложения по базовым проектам должны быть сосредоточены на разработке, внедрении и демонстрации общей структуры CEQ.

    2.4 Скоординированная осведомленность об уязвимостях (CVA):
    CyManII будет адаптировать наиболее скоординированные методы раскрытия уязвимостей для интеллектуального производства и внедрять инновации в CVA следующего поколения, которые включают ответственное и эффективное раскрытие информации и новые возможности и процессы упреждающего обнаружения. Предложения по проекту CVA должны быть сосредоточены на выявлении / определении, разработке, внедрении и демонстрации показателей и измерений воздействия CVA и ценности.

    2.5 TrustWorks-aaS:
    TrustWorks будет способствовать трансформации рынка, обеспечивая внедрение технических инноваций CyManII для персонала. Предложения по проектам TrustWorks должны быть сосредоточены на определении, разработке, внедрении и демонстрации процессов распространения для внедрения инструментов, технологий и методов CyManII в производственном секторе США.

    Полные описания трех тематических областей можно найти в полном RFP, размещенном здесь: https: // cymanii.org / rfp /. CyManII намеревается вручить до 6 наград, каждая от 50 000 до 250 000 долларов США, при условии утверждения Министерством энергетики и наличия средств.

    Любые вопросы относительно этого расширения следует направлять по электронной почте [email protected]

    Фосфорилированный 4E-BP1 связан с плохой выживаемостью при меланоме

    Abstract

    Цель: Пути передачи сигнала фосфатидилинозитол-3-киназы / AKT и RAS / митоген-активированной протеинкиназы опосредуют фосфорилирование 4E-BP1, высвобождая 4E-BP1 из кэпа мРНК и обеспечивая инициацию трансляции.Учитывая преобладание мутаций PTEN и BRAF в меланоме, мы сначала исследовали инициацию трансляции, измеренную по фосфорилированному 4E-BP1 (p-4E-BP1), в тканях и линиях клеток метастатической меланомы. Затем мы проверили связь между количеством общего и p-4E-BP1 и выживаемостью пациентов.

    План эксперимента: Были изучены семь линий клеток метастатической меланомы человека и 72 пациента с метастатической меланомой с доступными тканями метастатической опухоли и расширенной информацией о последующем наблюдении.Исследовали экспрессию транскрипта 4E-BP1, общего белка 4E-BP1 и p-4E-BP1. Взаимосвязь между транскриптом 4E-BP1 и экспрессией белка оценивалась в подмножестве опухолей пациентов ( n = 41). Связь между общим уровнем и уровнем p-4E-BP1 и выживаемостью была исследована в большей когорте пациентов ( n = 72).

    Результаты: 4E-BP1 был гиперфосфорилирован в 4 из 7 клеточных линий меланомы, несущих мутации BRAF и PTEN, по сравнению с нетрансформированными меланоцитами или клетками меланомы дикого типа RAS / RAF / PTEN.Транскрипт 4E-BP1 коррелировал с уровнями общего белка 4E-BP1, измеренными с помощью полуколичественного набора белков с обращенной фазой ( P = 0,012). Высокие уровни p-4E-BP1 были связаны с худшей общей и пострецидивной выживаемостью ( P = 0,02 и 0,0003, соответственно).

    Заключение: Наши данные показывают, что инициация трансляции — обычное явление при метастатической меланоме человека и коррелирует с худшим прогнозом. Следовательно, эффективное ингибирование путей, ответственных за фосфорилирование 4E-BP1, следует рассматривать для улучшения результатов лечения пациентов с метастатической меланомой.

    • 4E-BP1
    • перевод
    • метастатическая меланома
    Переводная релевантность

    Наше исследование показывает, что репрессор трансляции 4E-BP1 широко экспрессируется и часто фосфорилируется при метастатической меланоме. Мы также показываем, что более высокие уровни фосфорилированного 4E-BP1 ухудшают прогноз у пациентов с метастатической меланомой по сравнению с пациентами с относительно низкими уровнями фосфорилированного 4E-BP1.Поскольку фосфорилирование отключает 4E-BP1 от кэпа мРНК и приводит к растормаживанию биосинтеза белка, наша работа предполагает, что неограниченная трансляция белка может быть отличительным признаком наиболее агрессивной субпопуляции метастатических меланом. Следовательно, стратегии, препятствующие дерегулированной трансляции, такие как дефосфорилирование 4E-BP1 и / или повышающая регуляция, должны быть изучены как потенциальные методы лечения этого рака.

    За последние несколько лет наше понимание молекулярных изменений, лежащих в основе развития и прогрессирования меланомы, быстро продвинулось вперед, и в патогенез меланомы вовлечены несколько независимых сигнальных путей, включая RAS / митоген-активированную протеинкиназу (MAPK) и фосфатидилинозитол 3- пути киназы (PI3K) / AKT (1–3).Эти недавние открытия нашли свое отражение в разработке новых методов лечения с молекулярной направленностью, таких как специфические BRAF, MEK и мишени для ингибиторов рапамицина у млекопитающих. Однако эти терапевтические агенты показали лишь умеренную активность против меланомы в клинических испытаниях фазы II (4, 5). Прежде чем можно будет оценить улучшение результатов лечения пациентов с метастатической меланомой, необходимы альтернативные стратегии, основанные на лучшем понимании сложного молекулярного патогенеза меланомы.

    Путь PI3K / AKT канонически регулирует трансляцию посредством активации мишени рапамициназы млекопитающих и последующего фосфорилирования ее субстратов, 4E-BP1 и S6K, что приводит к образованию комплекса инициации трансляции eIF4F (6-8). Устойчивая активация этого механизма трансляции необходима для трансформации клеток человека в культуре и поддержания злокачественного фенотипа (9, 10). В связи с этим недавно было показано, что фосфорилирование 4E-BP1 коррелирует с худшей патологической степенью и прогнозом при раке груди человека (11).Путь RAS / MAPK также способствует образованию eIF4F и активации трансляции посредством регулируемого внеклеточными сигналами киназ-опосредованного фосфорилирования как S6K, так и 4E-BP1, и MNK-опосредованного фосфорилирования eIF4E. Таким образом, оба пути передачи сигналов RAS / MAPK и PI3K / AKT опосредуют фосфорилирование 4E-BP1, тем самым отделяя белок от кэпа мРНК и подавляя трансляцию (12, 13).

    В этом исследовании мы оценили образование комплекса eIF4F путем измерения общего и фосфорилированного 4E-BP1 (p-4E-BP1) в обеих клеточных линиях и в метастатических опухолях меланомы.Сначала мы оценили уровни 4E-BP1, фосфорилированного в разных сайтах (T37 / 46, T70 и S65), а также общие и фосфорилированные уровни факторов инициации трансляции eIF4G и eIF4E в панели из 7 линий клеток меланомы человека. Мы обнаружили, что уровни p-4E-BP1 широко варьировали в 7 линиях клеток меланомы и были выше в клетках с мутациями BRAF и PTEN. Поскольку p-4E-BP1 по-разному регулировался среди клеточных линий меланомы, мы затем использовали комбинацию анализов для изучения экспрессии общего и p-4E-BP1 в опухолях пациентов с метастатической меланомой и изучили связь как экспрессии белка, так и фосфорилирования. с выживанием.

    Наши данные показывают, что инициация трансляции, измеренная с помощью p-4E-BP1, является обычным явлением при метастатической меланоме человека и коррелирует с худшим прогнозом. Учитывая конвергенцию передачи сигналов RAS / MAPK и PI3K / AKT, которая опосредует фосфорилирование 4E-BP1, дефосфорилирование 4E-BP1 может оказаться эффективной стратегией для улучшения результатов лечения у пациентов с метастатической меланомой.

    Материалы и методы

    Анализ культур тканей и вестерн-блоттинг. Семь линий клеток метастатической меланомы человека, включая SkMel-31, SkMel-2, SkMel-11, SkMel-37, SkMel-39, SkMel-28 и SkMel-5 (любезно предоставлены доктором Аланом Хоутоном, Memorial Sloan- Kettering Cancer Center) и мутантную клеточную линию аденокарциномы молочной железы человека PI3K MCF-7 (Американская коллекция типовых культур). Клетки поддерживали либо в RPMI, либо в смеси DMEM / F-12 1: 1 с добавлением 2 ммоль / л глутамина, 50 единиц / мл пенициллина, 50 единиц / мл стрептомицина и 10% фетальной бычьей сыворотки и инкубировали при 37 ° C. в 5% CO 2 .Клетки HeMnLP поддерживали в среде 254 (Life Technologies) с добавкой для роста меланоцитов человека-2 (Life Technologies). Клетки собирали и лизировали в буфере mRIPA. Концентрацию белка определяли методом BCA (Pierce). Образцы подвергали SDS-PAGE и переносили на мембрану из поливинилиденфторида. Мембраны блокировали 5% молоком и исследовали 4E-BP1, p-4E-BP1 (T37 / 46), p-4E-BP1 (T70), p-4E-BP1 (S65), eIF4G, p-eIF4G (S1108). ), фактор инициации элонгации 4E (eIF4e), p-eIF4e (S209), PTEN (Cell Signaling Technology) и антитела к β-актину (Sigma-Aldrich).Белки детектировали с использованием набора для усиленной хемилюминесценции (Amersham Biosciences), а денситометрию выполняли с помощью программного обеспечения MultiGuage (FujiFilm Life Sciences).

    Характеристики пациента. Когорта исследования состояла из 72 пациентов с метастатической меланомой, идентифицированных с помощью базы данных междисциплинарной группы сотрудничества по меланоме в Медицинской школе Нью-Йоркского университета (48 мужчин, 24 женщины; средний возраст 60,0 лет). Из 77 образцов от 72 пациентов 34 были метастазами в лимфатические узлы, 28 — метастазами в кожу и 15 — висцеральными метастазами.Семьдесят семь образцов от 72 пациентов были использованы для иммуногистохимии, и 41 образец от 36 пациентов был использован для анализа экспрессии транскриптов и набора белков с обращенной фазой (RPPA). Из 77 образцов 39 были проанализированы с помощью иммуногистохимии, микроматричного анализа и RPPA на общий уровень и p-4E-BP1 на основе соответствующей доступности парафиновой ткани. Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) в сыворотке была измерена у 47 из 72 пациентов. Статус мутации BRAF был определен путем секвенирования ДНК в образцах тканей 29 из 72 пациентов.Среднее время наблюдения для когорты с момента постановки первичного диагноза до последней даты наблюдения составило 44,32 месяца. Исследование было одобрено Наблюдательным советом Университета Нью-Йорка, и все пациенты подписали информированное согласие перед включением в исследование. Соответствующие клинико-патологические, демографические данные и данные о выживаемости были записаны для всех пациентов.

    Иммуногистохимия. Иммуногистохимия была проведена на 77 фиксированных формалином, залитых парафином тканях с использованием кроличьих антител против человеческого T70-p4E-BP1 и общего 4E-BP1 (Cell Signaling Technologies).Вкратце, срезы депарафинизировали в ксилоле (3 смены), регидратировали с помощью градуированных спиртов (3 смены 100% этанола и 3 смены 95% этанола) и промывали дистиллированной водой. Получение индуцированного нагреванием эпитопа проводили в цитратном буфере 10 ммоль / л (pH 6,0) в течение 10 минут (оба антитела) в микроволновой печи мощностью 1200 Вт при мощности 90%. Срезы охлаждали в течение 30 минут, а затем промывали дистиллированной водой. Инкубацию и обнаружение антител проводили при 37 ° C на приборе NEXes (Ventana Medical Systems) с использованием буфера для реагентов Ventana и наборов для обнаружения, если не указано иное.Эндогенная пероксидазная активность блокировалась перекисью водорода. Антитела против T70-p4E-BP1 и общего 4E-BP1 разводили 1:50 и 1:40, соответственно, в PBS и инкубировали в течение ночи при комнатной температуре. Первичные антитела выявляли с помощью вторичного биотинилированного козьего антикроличьего антитела Ventana с последующим введением конъюгата стрептавидин-пероксидаза хрена. Комплекс визуализировали с помощью нафтол-AS-MX фосфатазы и комплекса Fast Red. Предметные стекла промывали дистиллированной водой, контрастировали гематоксилином, обезвоживали и помещали в постоянную среду.Соответствующие положительные и отрицательные контроли были включены в разделы исследования. Уровни экспрессии 4E-BP1 и p-4E-BP1 были основаны на доле клеток меланомы с положительным цитоплазматическим и / или ядерным окрашиванием и оценивались по непрерывной шкале от 0% (неопределяемое) до 100% (гомогенное окрашивание) с помощью лечащий патолог (HY), который не знал клинических данных. Несколько полей сканировали до того, как оценка процента опухолевых клеток, экспрессирующих 4E-BP1 или p-4E-BP1, регистрировалась как непрерывная переменная от 0 до 100%.Также регистрировалась интенсивность сигнала (0, 1+, 2+ или 3+).

    РППА. Подробный протокол см. В исх. 14. От одного до двух фиксированных, залитых парафином среза (толщиной 5 мкм) собирали со стеклянных предметных стекол и переносили в микроцентрифужную пробирку в 40-50 мкл 1% буфера для лизиса SDS. Затем лизат обрабатывали ультразвуком на водяной бане в течение 20 минут, кипятили при 100 ° C в течение 20 минут и инкубировали в термоблоке при 60 ° C в течение 20 минут. Лизат центрифугировали при 13000 об / мин в течение 10 мин.Супернатант переносили в пробирку для микроцентрифуги и проводили количественный анализ белка с помощью анализа BCA (Pierce). Затем к образцам добавляли β-меркаптоэтанол до 2,5% по объему. Образцы снова кипятили перед печатью лизата на предметных стеклах, покрытых нитроцеллюлозой, с помощью автоматизированного роботизированного устройства для измерения размеров. Перед воздействием первичного антитела предметные стекла были заблокированы для эндогенной пероксидазы, авидина и активности белка биотина. Сигнал первичного антитела усиливали с помощью системы амплификации сигнала 3,3′-диаминобензидинтетрахлорида DAKO.Интенсивность сигнала измеряли путем сканирования слайдов с помощью ImageQuant (Molecular Dynamics) и количественно оценивали с помощью автоматического модуля RPPA MicroVigene (VigeneTech). Используя программное обеспечение MicroVigene, была рассчитана интенсивность каждого пятна и рассчитана кривая концентрации интенсивности с наклоном и пересечением. Для сравнения с результатами по мРНК различия в нагрузке оценивали и корректировали путем нормализации интенсивностей экспрессии 4E-BP1 и p-4E-BP1 до регулируемой внеклеточным сигналом киназы 2.

    Экспрессия гена Affymetrix. Интеллектуальный анализ данных результатов массива Affymetrix U133 Plus 2.0 GeneChip для уровней транскрипта 4E-BP1 был проведен для всех доступных образцов свежей опухолевой ткани, которые включали 42 образца метастатической меланомы от 37 пациентов (в том числе 3 пациента с 2 метастазами и 1 пациент с метастазами). было 3 метастаза). Сбор тканей, экстракция цельной РНК, подготовка кРНК и анализ исходных данных выполнялись, как описано ранее (15).

    Статистический анализ. Описательная статистика была рассчитана для исходных демографических и клинико-патологических характеристик. Модель пропорциональных рисков Кокса использовалась для изучения связи между общими уровнями транскриптов 4E-BP1 и p-4E-BP1 и экспрессией белка с общей выживаемостью (время от первоначального диагноза меланомы до смерти) и выживаемостью после рецидива (время от первого рецидива до смерть). Уровни 4E-BP1 и p-4E-BP1 анализировали как непрерывные переменные и как положительное / отрицательное выражение с использованием 40% в качестве точки отсечения, поскольку значения встречались в бимодальном распределении без значений между 40% и 80%.Поскольку интенсивность окрашивания была равномерно сильной (2-3 +), интенсивность окрашивания не учитывалась в анализе. ЛДГ в сыворотке крови анализировали как дихотомическую переменную. Высокий уровень ЛДГ был определен как превышение верхнего предела нормы в Медицинском центре Нью-Йоркского университета (> 618 единиц / л). Многофакторный анализ выживаемости ЛДГ, места метастазирования и p-4E-BP1 в качестве непрерывной переменной был проведен с использованием многомерной модели пропорциональных рисков Кокса в подгруппе пациентов ( n = 47).Многофакторный анализ ЛДГ, места метастазирования и p-4E-BP1 как дихотомической переменной был проведен с помощью стратифицированного логрангового теста. Коэффициенты корреляции Спирмена использовали для изучения взаимосвязи между уровнями транскриптов и экспрессией белка. Чтобы проверить соответствие между положительной и отрицательной экспрессией маркеров, была рассчитана статистика κ и ее приблизительная SE. Все значения P были двусторонними со статистической значимостью на уровне 0,05 α .Все анализы проводились в статистическом программировании и программном пакете R. 7

    Результаты

    4E-BP1 гиперфосфорилируется в клеточных линиях меланомы. Уровни экспрессии белка репрессора трансляции 4E-BP1 измеряли с помощью вестерн-блоттинга на панели из 9 клеточных линий, включая мутантную клеточную линию рака молочной железы PI3K MCF-7, клеточную линию меланоцитов HeMnLP и 7 клеточных линий меланомы, охарактеризованных для N -RAS, BRAF и статус мутации PTEN.4E-BP1 был обнаружен в каждой из 9 клеточных линий (рис. 1).

    ). 4E-BP1 сильно экспрессировался в 4 из 7 линий клеток меланомы (SkMel-39, SkMel-28, SkMel-5 и SkMel-11), а также был гиперфосфорилирован в 4 из 7 линий клеток меланомы (SkMel-39, SkMel -28, СкМел-5, СкМел-37). Было обнаружено, что мутанты BRAF / PTEN SkMel-11, SkMel-39, SkMel-28 и SkMel-5 имеют в 2–3 раза более высокую экспрессию 4E-BP1 по сравнению с меланоцитами или N-RAS / BRAF SkMel дикого типа. -31. 4E-BP1 в SkMel-39, SkMel-28 и SkMel-5 также сильно гиперфосфорилировался в сайтах, критических для отделения от кэпа мРНК (T37 / 46, T70 и S65).Эти линии экспрессировали в 4-7 раз более высокие уровни p-4E-BP1 T37 / 46, в 4-5 раз более высокие уровни p-4E-BP1 (T70) и в 6-8 раз более высокие уровни p-4E-BP1. Уровни S65 выше, чем у меланоцитов или SkMel-31. Хотя SkMel-37 не сверхэкспрессировал 4E-BP1 по сравнению с меланоцитами, эти клетки экспрессировали в 6 раз более высокие уровни p-4E-BP1 (S65) по сравнению с HeMnLP. Также измеряли экспрессию и фосфорилирование факторов инициации трансляции eIF4G и eIF4E. Среди всех 9 клеточных линий была минимальная вариабельность либо общего, либо фосфорилированного eIF4G или eIF4E.Экспрессия PTEN также измерялась на панели. Мутантные линии PTEN SkMel-37, SkMel-39, SkMel-28 и SkMel-5 экспрессировали меньше PTEN, чем меланоциты или SkMel-31.

    Рис. 1.

    4E-BP1 экспрессируется и фосфорилируется в клеточных линиях меланомы. A, клеточная линия рака молочной железы MCF-7, меланоциты и 7 клеточных линий меланомы выращивали в 10-сантиметровых чашках в соответствующей поддерживающей среде в течение 24 часов перед сбором. Уровни экспрессии общих и фосфорилированных форм 4E-BP1, eIF4G и eIF4e измеряли с помощью вестерн-блоттинга.Экспрессию PTEN также измеряли с помощью вестерн-блоттинга. B, актин использовали в качестве контроля загрузки.

    p-4E-BP1 (T70) связан с плохой выживаемостью при метастатической меланоме человека. Общая экспрессия и экспрессия p-4E-BP1 (T70) оценивалась в 77 образцах от 72 пациентов с метастатической меланомой с использованием иммуногистохимии. Девяносто семь процентов образцов были окрашены положительно (> 0%) на 4E-BP1 и 74% образцов были окрашены положительно (> 0%) на p-4E-BP1 (T70; рис. 2A и B.

    ).Иммуногистохимическое окрашивание для 4E-BP1 дало значения в диапазоне от 0% до 100% со средним значением 95%. Иммуногистохимическое окрашивание p-4E-BP1 (T70) дало диапазон значений от 0% до 100% со средним значением 53%. Общее окрашивание и окрашивание p-4E-BP1 было обнаружено в ядре и цитоплазме клеток меланомы, тогда как опухолевые лимфоциты не окрашивались положительно ни на 4E-BP1, ни на p-4E-BP1. p-4E-BP1 был особенно обогащен в ядре, тогда как окрашивание 4E-BP1 было более равномерно распределено между ядром и цитоплазмой.Клетки, демонстрирующие митотические фигуры, сильно экспрессируют p-4E-BP1 (T70) (фиг. 2C и D).

    Рис. 2.

    Иммуногистохимическое определение p-4E-BP1 у пациентов с метастатической меланомой. Образец метастатической меланомы, показывающий диффузное цитоплазматическое и ядерное окрашивание клеток меланомы p-4E-BP1 с сохранением инфильтрирующих опухоль лимфоцитов при увеличении × 10 ( A ) и × 40 ( B ). Образцы метастатической меланомы, окрашенные отрицательно на p-4E-BP1, с экспрессией p-4E-BP1 в активно делящейся клетке (красное окрашивание с помощью нафтол-AS-MX фосфатазы и комплекса Fast Red) при × 10 ( C ) и × Увеличение 40 ( D ).

    Обнаружена статистически значимая связь между экспрессией p-4E-BP1 (T70) и худшей общей и пострецидивной выживаемостью [отношение рисков (HR) 1,01 и 1,01; P = 0,033 и 0,002, соответственно], из чего следует, что каждый 1% -ный рост окрашивания p-4E-BP1 увеличивает опасность на 1%. Обзор иммуногистохимии показал дихотомическое распределение окрашивания p-4E-BP1, так как 35 образцов имели положительный результат ≤40%, а 42 образца имели положительный результат ≥80%. Пациенты с окрашиванием p-4E-BP1> 40% имели худшую общую 5-летнюю выживаемость, чем пациенты с окрашиванием p-4E-BP1 ≤40% (HR, 2.12; P = 0,02, логранговый тест). Пациенты с более высоким окрашиванием p-4E-BP1 имели 5-летнюю выживаемость 44,3% [95% доверительный интервал (95% ДИ), 30,6-64,2%] по сравнению с 62,8% (95% ДИ, 46,5-84,9%) для пациентов. с окрашиванием ≤40% (рис. 3А

    ). Помимо низкой общей выживаемости в когорте с высоким p-4E-BP1 по сравнению с когортой с низким p-4E-BP1, между этими двумя группами наблюдалась значительная разница в пострецидивной выживаемости (HR 3,75; P = 0,0003). , лог-ранговый тест; рис. 3Б). Вероятность двухлетней выживаемости после рецидива составила 79.5% (95% ДИ, 64,9-97,4%) для субъектов с низкими значениями иммуногистохимии p-4E-BP1 (T70) и 38,0% (95% ДИ, 24,7-58,5%) для субъектов с высоким уровнем иммуногистохимии p-4E-BP1 ( T70) значения.

    Рис. 3.

    Высокие уровни p-4E-BP1 связаны с плохой общей и пострецидивной выживаемостью. A, Кривые Каплана-Мейера для пациентов с низкими / высокими значениями IHC.p4ebp1.T70 (на основе данных для 77 образцов без пропущенных значений). Вероятность пятилетнего выживания для двух групп составляет 62.8% (95% ДИ, 46,5-84,9%) и 44,3% (95% ДИ, 30,6-64,0%) соответственно. Разница в двух группах значима на уровне значимости 0,05 (HR, 2,12; P = 0,02, логранговый тест). B, Пострецидивные кривые Каплана-Мейера для пациентов с низкими / высокими значениями IHC.p4ebp1.T70 (на основе данных для 77 образцов без пропущенных значений). Между этими двумя группами была значительная разница в выживаемости после рецидива (HR 3,75; P = 0,0003, лог-ранговый тест). Вероятность двухлетней выживаемости после рецидива — 79.5% (95% ДИ, 64,9-97,4%) для субъектов с низкими значениями IHC.p4ebp1.T70 и 38,0% (95% ДИ, 24,7-58,5%) для субъектов с высокими значениями IHC.p4ebp1.T70.

    Поскольку пациенты с метастатической меланомой с висцеральными метастазами имеют худший прогноз по сравнению с пациентами с метастазами только в лимфатические узлы или кожу, было исследовано распределение метастатических участков в категориях p-4E-BP1 с высоким и низким уровнем иммуногистохимии. Доля висцеральных метастазов была немного выше среди лиц с низким уровнем иммуногистохимии p-4E-BP1 по сравнению с пациентами с высоким уровнем иммуногистохимии p-4E-BP1 [25.7% (9 из 35) против 14,3% (6 из 42), соответственно], но разница не была статистически значимой ( P = 0,25, точный критерий Фишера). Время от первичного диагноза до удаления метастазов также оценивалось в когортах с высоким и низким уровнем иммуногистохимии p-4E-BP1. Среднее время до метастазирования (в месяцах) для групп с низким и высоким показателем составило 38,4 месяца (95% ДИ, 15,3–75,1) и 18,1 месяца (95% ДИ, 12,9–36,5), соответственно. Однако разница не была статистически значимой ( P = 0.24, лог-ранговый тест).

    Поскольку у 4 пациентов было несколько образцов (у 3 субъектов было по 2 образца, а у 1 пациента было 3 образца), были дополнительно использованы модели хрупкости с несколькими обычно используемыми распределениями хрупкости (γ, гауссово и t различных степеней свободы). изучить влияние учета кластеризации на связь между общей выживаемостью и выживаемостью после рецидива и иммуногистохимией p-4E-BP1. Для общей выживаемости значения P оставались значимыми и варьировались от 0.От 023 до 0,038 с использованием хрупких моделей. Для пострецидивной выживаемости значения P оставались значимыми и варьировались от 0,002 до 0,004.

    p-4E-BP1 (T70) связан с худшей выживаемостью у пациентов с меланомой, независимо от известных прогностических факторов. сывороточных значений ЛДГ были измерены во время первого метастаза в подгруппе нашей когорты пациентов ( n = 47). В этой подгруппе мы обнаружили, что высокий уровень ЛДГ был связан с худшей выживаемостью. Связь между высоким уровнем ЛДГ и общей выживаемостью не была статистически значимой (HR, 1.55; P = 0,24). Однако значительно больший риск пострецидивной выживаемости наблюдался у пациентов с высоким уровнем ЛДГ (HR 2,26; P = 0,03, лог-ранговый тест). Многофакторный анализ выживаемости в подгруппе пациентов ( n = 47) показал, что p-4E-BP1 (T70) был связан с худшей выживаемостью у пациентов с меланомой, независимо от установленных прогностических показателей, в частности, места метастазирования и сывороточного ЛДГ. Связь между иммуногистохимическим анализом p-4E-BP1 и общей выживаемостью и выживаемостью после рецидива оставалась значительной (HR, 1.01 и 1.03; P = 0,03 и P <0,001 соответственно) после корректировки на уровень ЛДГ и место метастазирования с использованием многомерной модели пропорциональных рисков Кокса. Когда p-4E-BP1 (T70) рассматривался как дихотомическая переменная, после корректировки уровня ЛДГ и места метастазирования с помощью стратифицированного лог-рангового теста пациенты с более высоким окрашиванием p-4E-BP1 имели значительно худшую общую и пострецидивную выживаемость. по сравнению с пациентами с низким уровнем p-4E-BP1 (HR, 2,29 и 5,26; P = 0.04 и P <0,001 соответственно). Не было статистически значимой связи между уровнем p-4E-BP1 и местом метастазирования или между уровнями p-4E-BP1 и LDH.

    4E-BP1 и p-4E-BP1 (T37 / 46 и T70) могут быть обнаружены в образцах опухолей, залитых парафином, с помощью RPPA. В попытке количественно определить уровни общего и p-4E-BP1 в образцах тканей, залитых парафином, и сопоставить количество общего белка с уровнями транскриптов, мы использовали полуколичественную технологию RPPA.Лизаты опухолей были получены из 41 фиксированного формалином, залитого парафином среза метастатической меланомы. От каждого образца брали от одного до двух срезов. Эти лизаты были напечатаны на предметных стеклах, покрытых нитроцеллюлозой, и RPPA была проведена с антителами к 4E-BP1 и p-4E-BP1 (T37 / 46). Чтобы определить, коррелируют ли сигналы, обнаруженные с помощью RPPA, с уровнями, обнаруженными с помощью вестерн-блоттинга, была проанализирована подгруппа образцов с достаточным количеством белка, доступного для обоих методов (рис. 4A и B).

    ). Вестерн-блоттинг общего 4E-BP1 показал минимальную деградацию белка, указывая на то, что методика выделения белка из образцов, залитых парафином, поддерживает целостность белка (дополнительный рис.S1). Сравнение результатов денситометрии вестерн-блоттинга с результатами RPPA показало высокую степень корреляции как для общего ( r 2 = 0,81), так и для p-4E-BP1 ( r 2 = 0,93) уровней для этих образцы (рис. 4C). Помимо как 4E-BP1, так и p-4E-BP1 (T37 / 46), в этих образцах также были обнаружены p-4E-BP1 (T70), AKT и регулируемая внеклеточным сигналом киназа 2. Таким образом, 5 белков-мишеней были обнаружены в 41 опухоли человека с использованием <1 мкг опухолевого белка / образец.

    Рис. 4.

    Обнаружение RPPA p-4E-BP1 в залитых парафином срезах метастатической меланомы. A, лизатов, полученных из залитых парафином срезов метастатической меланомы толщиной 5 мкм, подвергали иммуноблоттингу на p-4E-BP1 (T37 / 46) и количественно оценивали сигналы с помощью денситометрии. Для сравнения с данными микроматрицы все данные об общей RPPA и p-4E-BP1 были нормализованы к общему белку киназы, регулируемому внеклеточным сигналом, для каждого образца. B, серийных разведений лизатов из 49 залитых парафином образцов метастатической меланомы помещали на предметные стекла и инкубировали с первичным антителом p-4E-BP1.Усиление коричневого сигнала достигалось опосредованным пероксидазой хрена расщеплением 3,3′-диаминобензидинтетрахлорида. C, p-4E-BP1 RPPA-сигнал сильно коррелирует с западным сигналом p-4E-BP1 ( R 2 = 0,93).

    Транскрипт 4E-BP1 коррелирует с экспрессией 4E-BP1 RPPA. Учитывая преобладание общего 4E-BP1 в клеточных линиях меланомы, мы профилировали 42 образца метастатической меланомы от 37 пациентов на мРНК 4E-BP1 с использованием микрочипа Affymetrix GeneChip.Нормализованные значения микроматрицы 4E-BP1 варьировались от 8,47 до 11,87 со средним значением 10,36. Чтобы определить, связаны ли более высокие уровни транскриптов с повышенной экспрессией общего белка 4E-BP1, мы использовали метод Спирмена для изучения корреляции между полуколичественными результатами RPPA и значениями микроматрицы. Обнаружена положительная корреляция между уровнями транскрипта 4E-BP1 и экспрессией 4E-BP1 RPPA ( r s = 0,39; P = 0,012). Также была обнаружена слабая корреляция между уровнями транскрипта 4E-BP1 и иммуногистохимической экспрессией 4E-BP1 ( r s = 0.27), но эта связь не была статистически значимой ( P = 0,12).

    Обсуждение

    Наше исследование выявило несколько важных выводов. Мы обнаружили, что 4E-BP1 сильно экспрессируется и гиперфосфорилируется в клеточных линиях меланомы с мутациями BRAF и PTEN, что иллюстрирует конвергенцию гиперактивированной передачи сигналов MAPK и PI3K на 4E-BP1. Мы также показали, что накопление общего 4E-BP1 связано с повышенной экспрессией транскрипта. Более того, мы показали, что p-4E-BP1 при метастазах меланомы связан с плохой выживаемостью.Связь между p-4E-BP1 и общей выживаемостью в значительной степени обусловлена ​​увеличением пострецидивного риска, связанного с более высокими уровнями p-4E-BP1.

    Связь между p-4E-BP1 при меланоме и худшей выживаемостью согласуется с данными по раку груди (11) и яичников (16), которые показали значительную корреляцию между p-4E-BP1 и плохим прогнозом, и высокой степенью патологии. Наше наблюдение за 4E-BP1, локализованным как в ядре, так и в цитоплазме, подтверждает предыдущие сообщения о ядерной и цитоплазматической экспрессии в клетках рака молочной железы и фибробластах эмбрионов мыши (11, 17).Специфичность ядерного иммуноокрашивания была показана с помощью эксперимента по блокированию с использованием антитела 4E-BP1, предварительно адсорбированного очищенным рекомбинантным белком 4E-BP1. Как ядерная, так и цитоплазматическая реактивность были отменены в клетках меланомы, тем самым подтверждая специфичность антитела 4E-BP1 (данные не показаны).

    В этом исследовании мы также использовали новую технологию высокопроизводительного набора белков, которая позволила обнаруживать белковые мишени всего в 10 нг опухолевого белка, экстрагированного из залитых парафином срезов меланомы.Это оказалось полезным подходом для количественного анализа гиперактивированных сигнальных сетей при меланоме. Было обнаружено, что уровни транскрипта 4E-BP1 коррелируют с экспрессией 4E-BP1, измеренной с помощью RPPA, предполагая, что накопление 4E-BP1 происходит вторично по отношению к увеличению экспрессии сообщений. Тот факт, что слабая корреляция транскрипта 4E-BP1 с иммуногистохимической экспрессией белка не достигла статистической значимости, можно объяснить гетерогенностью различных участков опухоли, используемых для сбора мРНК и белка.

    Наше исследование показывает, что p-4E-BP1 значительно снижает выживаемость независимо от ЛДГ и места метастазирования. Ограничением этого многомерного анализа является то, что большинство метастазов произошло в результате хирургической резекции доступных тканей, таких как кожа и лимфатический узел. Таким образом, это преобладание легко доступных метастазов в нашей когорте может ограничивать достоверность независимой ассоциации с исходом.

    Необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить, увеличиваются ли мутации PTEN и BRAF в опухолях пациентов с высоким уровнем p-4E-BP1.Предварительный анализ тканей 29 пациентов из нашей когорты не выявил статистически значимой связи между уровнями p-4E-BP1 и мутацией BRAF (DNS). Однако в настоящее время проводится секвенирование мутаций BRAF и PTEN в большем количестве образцов метастатической меланомы.

    Хотя p-4E-BP1 был связан с плохой общей и пострецидивной выживаемостью, статистически значимой связи между общей экспрессией белка 4E-BP1 и общей или пострецидивной выживаемостью не наблюдалось.Отсутствие корреляции с плохой выживаемостью может быть отражением функции супрессора трансляции 4E-BP1. Учитывая, что нефосфорилированный 4E-BP1 связывается с кэпом мРНК и предотвращает трансляцию онкогенных белков, можно было бы ожидать, что некоторые преимущества выживания будут переданы пациентам, опухолевые клетки которых устойчиво экспрессируют 4E-BP1. Фактически, индукция экспрессии 4E-BP1 для подавления способности вышестоящих сигнальных путей фосфорилировать и инактивировать 4E-BP1 может оказаться эффективной противораковой стратегией.

    Учитывая преобладание p-4E-BP1 в наиболее агрессивной подгруппе метастатических меланом, стратегии повышения регуляции и / или дефосфорилирования 4E-BP1 могут быть мощными терапевтическими вариантами при этом заболевании. Комбинированное подавление вышестоящих сигнальных путей, которые активируют 4E-BP1 (PI3K / AKT и RAS / MAPK), также может эффективно сдерживать дерегулированную трансляцию. Недавно сообщалось, что комбинированная мишень рапамицина и MEK у млекопитающих эффективно ингибирует фосфорилирование 4E-BP1, образование полисом и рост клеток при немелкоклеточном раке легкого (18).Таким образом, нацеливание на мишень рапамицина и MEK у млекопитающих может быть полезной стратегией дефосфорилирования 4E-BP1 и ингибирования трансляции. В качестве альтернативы может оказаться эффективным прямое изменение механизма перевода. Небольшие молекулы, такие как фенэтилизотиоцианат, которые индуцируют экспрессию 4E-BP1 и предотвращают фосфорилирование 4E-BP1, находятся в стадии разработки (19). Также разрабатываются низкомолекулярные ингибиторы eIF4e и ингибиторы взаимодействия eIF4e-eIF4G для предотвращения сборки комплекса eIF4F и ингибирования трансляции в раковых клетках (20).

    В целом, комплекс eIF4F получает входной сигнал от многих путей передачи митогенного сигнала. Фосфорилирование 4E-BP1 становится общей темой в стратегии раковых клеток по уклонению от физиологических ограничений биосинтеза белка. Дальнейшее изучение сигнальных путей, которые регулируют экспрессию и фосфорилирование 4E-BP1 при меланоме, может выявить дополнительные терапевтические стратегии для ослабления неограниченного биосинтеза белка при этой злокачественной опухоли.

    Раскрытие информации о потенциальных конфликтах интересов

    О потенциальных конфликтах интересов не сообщалось.

    Сноски

    • ↵7 Основная группа разработчиков R. R: язык и среда для статистических вычислений. Вена (Австрия): Фонд R для статистических вычислений; 2007. http://www.R-project.org.

    • Грантовая поддержка: Американская кожная ассоциация и Программа обучения медицинских ученых NIH, грант GM07739 (К.Э. О’Рейли), онкологический центр Нью-Йоркского университета, основной грант 5 P30 CA 016087-27 и Фонд химиотерапии (И. Осман), а также Университет им. Техас М.Грант P50 CA093459 Онкологического центра им. Д. Андерсона по специализированной программе передовых исследований в области меланомы и Премия молодых исследователей Американского общества клинической онкологии по борьбе с раком (M.A. Davies).

    • Расходы на публикацию этой статьи были частично покрыты за счет оплаты страницы. Таким образом, данная статья должна быть помечена как реклама в соответствии с 18 U.S.C. Раздел 1734 исключительно для указания этого факта.

    • Примечание: Дополнительные данные для этой статьи доступны на сайте Clinical Cancer Research Online (http://clincancerres.aacrjournals.org/).

    • К.Э. О’Рейли и М. Варича внесли равный вклад в эту работу.

      • Принято 13 декабря 2008 г.
      • Получено 14 сентября 2008 г.
      • Исправление получено 7 декабря 2008 г.

    Ссылки

    1. Миллер А.Дж., Михм М.С., младший Меланома. N Engl J Med 2006; 355: 51–65.

    2. Haluska FG, Tsao H, Wu H, Haluska FS, Lazar A, Goel V.Генетические изменения сигнальных путей при меланоме. Clin Cancer Res 2006; 12: 2301–7s.

    3. Goel VK, Lazar AJ, Warneke CL, Redston MS, Haluska FG. Изучение мутаций в BRAF, NRAS и PTEN при первичной кожной меланоме. J Invest Dermatol 2006; 126: 154–60.

    4. Хаасс Н.К., Спроессер К., Нгуен Т.К. и др. Активированный митогеном белок / регулируемый внеклеточным сигналом ингибитор киназы киназы AZD6244 (ARRY-142886) вызывает остановку роста клеток меланомы и регрессию опухоли в сочетании с доцетакселом.Clin Cancer Res 2008; 14: 230–9.

    5. Escudier B, Lassau N, Angevin E, et al. Фаза I испытания сорафениба в комбинации с IFN α-2a у пациентов с неоперабельной и / или метастатической почечно-клеточной карциномой или злокачественной меланомой. Clin Cancer Res 2007; 13: 1801–9.

    6. Vivanco I, Sawyers CL. Путь AKT фосфатидилинозитол-3-киназы при раке человека. Нат Рев Рак 2002; 2: 489–501.

    7. Shaw RJ, Cantley LC. Передача сигналов Ras, PI (3) K и mTOR контролирует рост опухолевых клеток. Природа 2006; 441: 424–30.

    8. Mamane Y, Petroulakis E, LeBacquer O, Sonenberg N. mTOR, инициация трансляции и рак. Онкоген 2006; 25: 6416–22.

    9. Авдулов С., Ли С., Михалек В. и др. Активация трансляционного комплекса eIF4F важна для возникновения и поддержания злокачественного фенотипа в эпителиальных клетках молочной железы человека.Cancer Cell 2004; 5: 553–63.

    10. Wendel HG, De Stanchina E, Fridman JS, et al. Передача сигналов выживания с помощью Akt и eIF4E в онкогенезе и терапии рака. Природа 2004; 428: 332–7.

    11. Rojo F, Najera L, Lirola J и др. 4E-связывающий белок 1, отличительный признак клеточной сигнализации при раке груди, который коррелирует с патологической степенью и прогнозом. Clin Cancer Res 2007; 13: 81–9.

    12. Holland EC, Sonenberg N, Pandolfi PP, Thomas G.Сигнальный контроль трансляции мРНК в патогенезе рака. Онкоген 2004; 23: 3138–44.

    13. Roux PP, Shahbazian D, Vu H, et al. Передача сигналов RAS / ERK способствует сайт-специфическому фосфорилированию рибосомного белка S6 через RSK и стимулирует кэп-зависимую трансляцию. J Biol Chem 2007; 282: 14056–64.

    14. Tibes R, Qiu Y, Lu Y, et al. Обращенный фазовый набор белков: проверка новой протеомной технологии и полезности для анализа образцов первичной лейкемии и гемопоэтических стволовых клеток.Mol Cancer Ther 2006; 5: 2512–21.

    15. Веласкес Э.Ф., Янковиц М., Павлик А. и др. Клиническая значимость нейтральной эндопептидазы (NEP / CD10) при меланоме. Журнал «Перевод», 2007; 5: 2.

    16. Castellvi J, Garcia A, Rojo F и др. Фосфорилированный 4E-связывающий белок 1: признак передачи сигналов клеток, который коррелирует с выживаемостью при раке яичников. Рак 2006; 107: 1801–11.

    17. Ронг Л., Ливингстон М., Сукари Р. и др.Контроль клеточной локализации eIF4E с помощью eIF4E-связывающих белков, 4E-BP. РНК 2008; 14: 1318–27.

    18. Legrier ME, Yang CP, Yan HG, et al. Нацеливание на трансляцию белка при немелкоклеточном раке легкого человека с помощью комбинированной мишени для подавления рапамицина MEK и млекопитающих. Cancer Res 2007; 67: 11300–8.

    19. Ху Дж., Штрауб Дж., Сяо Д. и др. Фенэтилизотиоцианат, компонент овощей семейства крестоцветных для химиопрофилактики рака, ингибирует cap-зависимую трансляцию, регулируя уровень и фосфорилирование 4E-BP1.Cancer Res 2007; 67: 3569–73.

    20. Graff JR, Konicek BW, Carter JH, Marcusson EG. Нацеленность на фактор инициации трансляции эукариот 4E для лечения рака. Cancer Res 2008; 68: 631–4.

    ED2 Ответное открытое письмо BP1


    Уважаемый Фил,

    За последние 20 месяцев Группа по работе с клиентами, независимая группа со специальными знаниями, тщательно изучала, подвергала сомнению и подвергала сомнению элементы, входящие в бизнес-план WPD на 2023-2028 годы, как вы его разработали.Следя за ходом выполнения вашего плана, мы стремимся продвигать наилучшие результаты для потребителей и заинтересованных сторон, выявляя их проблемы и насколько они влияют на разработку вашего подхода и ваши обязательства перед ними.

    В конце прошлого месяца вы опубликовали предварительный вариант этого плана с сопроводительным консультационным документом, в котором излагаются предложения WPD и запрашиваются отзывы заинтересованных сторон об их приоритетах, потребностях и ожиданиях. Мы с нетерпением ждем, как эти взгляды будут учтены в уже собранных вами широкомасштабных и глубоких исследовательских отзывах, наряду с вашим собственным опытом в качестве долгосрочных хранителей электросети с обширным пониманием оптимизации решений для оказания положительного воздействия. желаемые потребителями и заинтересованными сторонами для эффективного и действенного удовлетворения будущего спроса.

    Ваш подход к публикации в настоящее время позволяет заранее увидеть ваши планы и обязательства, предлагая потребителям и заинтересованным сторонам возможность влиять на более широкие элементы стратегии, подхода и результатов WPD. Однако, как CEG, мы также видим, что это окно возможностей начинает закрываться, поскольку у вас есть ограниченное время для улучшения бизнес-плана, прежде чем вы достигнете почти окончательной версии в июне 2021 года. Поэтому мы пользуемся этой возможностью, чтобы четко установить наши взгляды на этом этапе.

    Следующие пункты нацелены на обеспечение того, чтобы дальнейшие итерации бизнес-плана обеспечивали большее обоснование того, как вы рассматриваете потребности и ожидания потребителей и заинтересованных сторон, а также значительные изменения, которые ваш бизнес должен внести, чтобы достичь нулевого результата и принять: цифровизацию; декарбонизация; демократизация и децентрализация энергетической системы.

    1. Ваш подход к взаимодействию с заинтересованными сторонами при подготовке к разработке вашего бизнес-плана был более всеобъемлющим и всеобъемлющим, чем для текущего периода регулирования.Это дает вам большую детализацию потребностей и желаний заинтересованных сторон, но также устанавливает ожидание, что эти высказанные мнения будут учтены в вашем окончательном плане. В настоящее время конкретные обязательства, взятые в плане, по всей видимости, отражают методы работы WPD, а не объединяют понимание конкретного вклада заинтересованных сторон и преобладающей среды, в которой будет реализован план.
    2. Мы будем стремиться четко понять, чем будет заметно отличаться от для потребителей и заинтересованных сторон в конце ED2, посредством инвестиций и инициатив, которые вы предлагаете.Большинство обязательств на этом этапе описывают задачи, которые возьмет на себя бизнес, а не определяют результаты и воздействия, которых вы стремитесь достичь. Возможно, следовательно, объемы в основном определяются как рост от ED1, а не оправдываются выгодами, перевешивающими затраты.
    3. Нам еще предстоит увидеть в достаточной мере рассмотрение альтернативных вариантов, изменение скорости или более высокие амбиции, чтобы действительно отразить характер и масштаб изменения энергетической системы, которых можно ожидать в ближайшее десятилетие, когда мы перейдем к нулевому показателю.Большинство обязательств в вашем проекте плана представляют собой постепенные изменения по сравнению с теми, которые в настоящее время представлены в ED1. Однако в некоторых случаях более радикальные или амбициозные обязательства могут быть оправданы для оказания необходимого воздействия и обеспечения возможности более широких изменений системы. По мнению CEG, варианты, представленные на первой консультации по бизнес-плану, обычно ограничиваются масштабированием предлагаемых обязательств ED2 и недостаточно исследуют аппетит заинтересованных сторон к более фундаментальным изменениям в вашем подходе и практике.
    4. Мы надеемся увидеть в будущих проектах бизнес-планов: доказательства и обоснование затрат; учет стремления к эффективности и взглядов потребителей и заинтересованных сторон на соотношение цены и качества (например, в отношении профилей счетов). Это позволит плательщикам счетов в контексте и деталях полностью понять влияние на их карманы.

    Вы предоставили CEG доступ ко всем уровням вашего бизнеса, что привело к открытому и прозрачному подходу к нам на протяжении всего процесса разработки вашего бизнес-плана.Мы приветствуем это позитивное взаимодействие и радикальную откровенность дискуссий, которые мы провели на всех уровнях. Мы надеемся, что эти комментарии помогут вам при рассмотрении вопроса о дальнейшем развитии вашего плана, чтобы наилучшим образом обслуживать существующих и будущих потребителей, обеспечивая при этом достаточное обоснование ваших решений и обязательств. Мы с нетерпением ждем возможности пообщаться с вами по конкретным направлениям плана, которые мы ставим перед нами от имени клиентов и заинтересованных сторон.

    С уважением

    Дункан МакКомби
    Председатель Группы по работе с клиентами Western Power Distribution

    Г-н Д. Маккомби
    Председатель КЭГ в WPD

    16 марта 2021 года

    Уважаемый Дункан

    Уважаемый Дункан хотел бы поблагодарить вас за ваше письмо от 22 февраля и сказать, что я ценю работу, которую делает Группа взаимодействия с клиентами (CEG), чтобы поставить перед нами задачу гарантировать, что наш бизнес-план RIIO-ED2 обеспечит наилучшие возможные результаты для наших клиентов и более широких заинтересованных сторон.

    Как вы говорите, наш первый проект бизнес-плана был опубликован 27 января 2021 года и был предметом обширных консультаций с заинтересованными сторонами с целью его доработки на основе мнений заинтересованных сторон. Мы также проведем вторую консультацию после нашей второй публикации проекта бизнес-плана в марте, до третьей итерации, которая будет представлена ​​в Ofgem Challenge Group (CG) 1 июля 2021 года.

    С настоящего момента и до представления CG остается возможность для CEG продолжать предлагать нам улучшить наш план.Несмотря на то, что наш план на 1 июля должен быть как можно более полным, будет постоянная возможность для внесения изменений в план, поскольку мы будем обсуждать аспекты как с CG, так и с CEG до окончательного представления в Ofgem 1 декабря 2021 года.

    Я приветствую мнения, содержащиеся в вашем письме, и считаю, что они полезны в процессе завершения работы над нашим бизнес-планом. Теперь я хотел бы ответить на конкретные мнения, которые вы высказываете, в указанном порядке:

    1. Я рад, что CEG признает, что наше взаимодействие с заинтересованными сторонами было как всеобъемлющим, так и всеобъемлющим.Наши обширные консультации с заинтересованными сторонами продолжаются, и в ходе этого процесса наши обязательства будут развиваться и уточняться. Я думаю, важно признать, что наш второй проект бизнес-плана будет отражать переход от первого проекта, в котором мы перейдем от «воспроизведения приоритетов заинтересованных сторон» к тому, что WPD использует свои подробные знания для усиления основных обязательств, содержащихся в плане. Эти знания гарантируют, что у наших заинтересованных сторон есть план, который отвечает их потребностям, является устойчивым и, конечно же, остается сложным.Г-н Д. Маккомби, председатель CEG в WPD Avonbank Feeder Road Bristol BS2 0TB Наша ссылка Дата продления вашей ссылки CEG1 16 марта 2021 г.

    2. Что касается воздействия, которое заинтересованная сторона увидит к концу RIIO-ED2, на основе нашего бизнес-плана . Это справедливый вопрос, на который мы можем лишь частично ответить на данном этапе, поскольку план все еще находится в разработке. На высоком уровне мы стремимся к тому, чтобы наши заинтересованные стороны получали отличное обслуживание клиентов по мере того, как мы разрабатываем и эксплуатируем все более умную и гибкую сеть, включая разумные инвестиции в те вещи, которые обеспечивают более быстрый прогресс к нулевому результату — и все это при сохранении счета на уровне или около текущего уровня.Когда мы представим наш бизнес-план в CG в июле, мы сможем продемонстрировать измеримые различия для заинтересованных сторон к концу RIIO-ED2 и подчеркнуть наши амбиции по обеспечению того, чтобы наши заинтересованные стороны получили исключительное предложение от WPD.

    3. Я принимаю к сведению ваше мнение о наших обязательствах. Мы провели семинары с нашими заинтересованными сторонами, чтобы обсудить наши стратегии в ключевых областях, включая: уязвимость клиентов, связи, цифровизация, умные и гибкие сети, инновации и экологическая устойчивость.На этих семинарах наши заинтересованные стороны ясно говорят нам, чего они хотят от нас, и во многих случаях призывают нас идти дальше. В целом, если заинтересованные стороны поддержат более радикальные и амбициозные изменения, мы примем это и учтем в нашем плане. Я думаю, что это допускает большее «совместное творчество», чем план, в котором WPD устанавливает все, основываясь исключительно на своем видении амбиций.

    4. Мы абсолютно осознаем необходимость обоснования предлагаемых объемов деятельности, наряду с демонстрацией эффективности наших затрат, в нашем плане RIIOED2.Ранее мы представляли подгруппе CEG нашу работу по тестированию эффективности наших затрат, а также наши планы в отношении текущей работы перед июльским представлением. Построение нашего плана снизу вверх обеспечивает прозрачность для проверки всех элементов нашего плана и демонстрации соотношения цены и качества. WPD всегда стремилась представить это наиболее значимым образом нашим заинтересованным сторонам, и поэтому мы ранее представили подгруппе наши предложения о том, как мы будем представлять влияние законопроекта на различные политические и финансовые решения для наших заинтересованных сторон.Мы приветствуем отзывы подгруппы КЭГ по этому поводу, поскольку мы продолжаем совершенствовать нашу работу перед ее представлением в Группу задач.

    Спасибо за ваши положительные комментарии о доступе к бизнесу и положительное взаимодействие с моими командами. Я признаю важную роль, которую CEG играет в помощи нам в улучшении нашего плана для RIIO-ED2, и считаю, что единственный способ действительно достичь наилучшего возможного плана для WPD будет заключаться в том, чтобы мои команды были прозрачными и позитивно реагировали на проблемы. вы позируете.

    Спасибо за ваши наблюдения, и я с нетерпением жду продолжения диалога и действительно вызова для нас!

    С уважением,

    Фил Свифт
    Главный исполнительный директор

    Щелкните здесь, чтобы загрузить копию этого письма в формате PDF

    Кто мы, чем мы занимаемся и как с нами связаться

    Группа взаимодействия с клиентами (CEG) обеспечивает независимую проверку и оспаривает процесс бизнес-планирования и принятия решений WPD для RIIO-ED2, отражая потребности и предпочтения существующих и будущих потребителей и способствуя достижению хороших результатов для клиентов.Мы уделяем особое внимание доступности и защите потребителей в уязвимых условиях, окружающей среде, устойчивости и переходу к низкоуглеродной энергетической системе.

    Чтобы получить дополнительную информацию и познакомиться с нашими членами, нажмите здесь.

    Чтобы связаться с нами, нажмите здесь.

    Как связаться с Western Power Distribution (WPD)

    Чтобы просмотреть их бизнес-план или обсудить с WPD бизнес-план ED2, нажмите здесь.

    Краткая инвентаризация боли (BPI) | Онкологический центр Андерсона

    Проверка

    Cleeland CS, Райан KM.Оценка боли: глобальное использование Краткого перечня боли. Ann Acad Med Singapore 23 (2): 129-138, 1994.

    Cleeland CS. Измерение боли субъективным отчетом. В: Chapman CR, Loeser JD, редакторы. Достижения в исследованиях и терапии боли , Том 12: Проблемы измерения боли. Нью-Йорк: Raven Press; 1989. С. 391-403.

    Atkinson TM, Rosenfeld BD, Sit L, et al. Использование подтверждающего факторного анализа для оценки конструктивной валидности Краткого перечня боли (BPI). J Pain Symptom Manage 41 (3): 558-565, 2011.

    .

    Ferreira KA, Teixeira MJ, Mendoza TR, Cleeland CS. Валидация краткой инвентаризации боли для бразильских пациентов, страдающих болью. Support Care Cancer 19 (4): 505-511, 2011.

    .

    Калядина С.А., Ионова Т.И., Иванова М.О., Успенская О.С., Киштович А.В., Мендоза Т.Р., Го Х., Новик А., Клиленд К.С., Ван XS. Краткая справка о боли в России: проверка и применение при онкологической боли. J Pain Symptom Manage 35 (1): 95-102, 2008.

    Mendoza TR, Mayne T, Rublee D, Cleeland CS. Надежность и валидность модифицированной краткой формы Краткого перечня боли у пациентов с остеоартритом. Eur J Pain 10 (4): 353-361, 2006.

    Зельман Д.К., Гор М., Герцог Э., Тай К.С., Бранденбург Н. Валидация модифицированной версии Краткого перечня боли для болезненной диабетической периферической нейропатии. J Pain Symptom Manage 29 (4): 401-410, 2005.

    .

    Coplan PM, Schmader K, Nikas A, et al. Разработка меры бремени боли из-за опоясывающего герпеса и постгерпетической невралгии для профилактических испытаний: адаптация Краткого перечня боли. J Pain 5 (6): 344-356, 2004.

    Mendoza TR, Chen C, Brugger A, et al. Полезность и валидность модифицированного краткого перечня болей в испытании послеоперационных обезболивающих с множественными дозами. Clin J Pain 20 (5): 357-362, 2004.

    .

    Келлер С., Банн С.М., Додд С.Л., Шейн Дж., Мендоза Т.Р., Клиленд К.С. Пригодность Краткого перечня болей для использования при документировании результатов лечения пациентов с нераковой болью. Clin J Pain 20 (5): 309-318, 2004.

    .

    Yun YH, Mendoza TR, Heo DS, Yoo T, Heo BY, Park HA, Shin HC, Wang XS, Cleeland CS.Разработка инструмента оценки боли при раке в Корее: валидационное исследование корейской версии Краткого перечня боли. Онкология 66 (6): 439-444, 2004.

    Badia X, Muriel C, Gracia A и др. Валидация испанской версии Краткого обзора боли у пациентов с онкологической болью [на испанском языке]. Med Clin (Barc) 120 (2): 52-59, 2003.

    Klepstad P, Loge JH, Borchgrevink PC, Mendoza TR, Cleeland CS, Kaasa S. Норвежская анкета для краткой инвентаризации боли: перевод и проверка у больных раком с болью. J Pain Symptom Manage 24 (5): 517-525, 2002.

    .

    Laudico AV, Mendoza TR, Siguan SS, Cleeland CS. Измерение интенсивности боли при раке и ее влияния на повседневное функционирование: проверка кебуанской версии Краткого перечня боли (BPI-Ce). Philipp J Surg Spec 57 (3): 94-99, 2002.

    Mystakidou K, Mendoza T, Tsilika E, et al. Греческий краткий перечень боли: подтверждение и полезность при раковой боли. Онкология 60 (1): 35-42, 2001.

    Гер LP, Ho ST, Sun WZ, Wang MS, Cleeland CS.Подтверждение краткой инвентаризации боли у населения Тайваня. J Pain Symptom Manage 18 (5): 316-322, 1999.

    .

    Radbruch L, Loick G, Kiencke P, et al. Проверка немецкой версии Краткого перечня боли. J Pain Symptom Manage 18 (3): 180-187, 1999.

    .

    Saxena A, Mendoza T, Cleeland CS. Оценка боли при раке в северной Индии: проверка краткого перечня боли на хинди — BPI-H. J Pain Symptom Manage 17 (1): 27-41, 1999.

    .

    Юки Дж., Мендоза Т., Клиленд К.С., Накамура Ю., Такеда Ф.Краткий инструмент оценки боли при раке на японском языке: полезность Японского краткого перечня боли — BPI-J. J Pain Symptom Manage 16 (6): 364-373, 1998.

    .

    Caraceni A, Mendoza TR, Mencaglia E, et al. Проверочное исследование итальянской версии Краткого перечня боли (Breve Questionario per la Valutazione del Dolore). Боль 65 (1): 87-92, 1996.

    .

    Ван XS, Mendoza TR, Gao SZ, Cleeland CS. Китайская версия Краткого обзора боли (BPI-C): его разработка и использование в исследовании боли при раке. Боль 67 (2-3): 407-416, 1996.

    Larue F, Carlier AM, Brasseur L, Colleau SM, Cleeland CS. Оценка распространенности и тяжести боли при онкологических заболеваниях во Франции: Французский краткий перечень боли [аннотация]. 10-е ежегодное научное собрание Американского общества боли, Новый Орлеан, Лос-Анджелес, 7-10 ноября 1991 г.

    Клиническое приложение

    Наламачу С., Виман М., Беднарек Л., Читра С. Влияние анатомического расположения 5% -ного пластыря с лидокаином на эффективность и переносимость постгерпетической невралгии. Пациенты предпочитают приверженность 7: 551-557, 2013.

    Ван XS, Рейнс Л.Д., Шиу А.С. и др. Стереотаксическая лучевая терапия для лечения метастазов в позвоночник у пациентов без компрессии спинного мозга: исследование фазы 1-2. Lancet Oncol 13 (4): 395-402, 2012.

    .

    Mendoza TR, Koyyalagunta D, Burton AW и др. Изменения боли и других симптомов у пациентов с болезненным переломом позвонков, связанным с множественной миеломой, после кифопластики или вертебропластики. J Pain 1 3 (6): 564-570, 2012.

    Vadhan-Raj S, von Moos R, Fallowfield LJ, et al. Клиническая польза у пациентов с метастатическим поражением костей: результаты 3 фазы исследования деносумаба по сравнению с золедроновой кислотой. Ann Oncol 23 (12) 3045-3051, 2012.

    Ши Кью, Ван XS, Мендоза Т.Р., Пандья К.Дж., Клиленд CS. Оценка стойкой боли при раке: сравнение текущих оценок боли и боли, запомненной на прошлой неделе. J Pain Symptom Manage 37 (2): 168-174, 2009.

    .

    Atkinson TM, Mendoza TR, Sit L, Passik S, Scher HI, Cleeland C, Basch E.Краткая инвентаризация боли и его «сильнейшая боль за последние 24 часа»: соображения конечной точки клинического исследования. Pain Med 11: 337-346, 2010.

    .

    Dworkin RH, Turk DC, Wyrwich KW, et al. Интерпретация клинической значимости результатов лечения в клинических испытаниях хронической боли: рекомендации IMMPACT. J Pain 9 (2): 105-121, 2008.

    Cleeland CS. Измерение боли при метастатическом поражении костей: запись опыта пациента. Clin Cancer Res 12 (20 часть 2): 6236s-6242s, 2006.

    Cleeland CS, Nakamura Y, Mendoza TR, Edwards KR, Douglas J, Serlin RC. Измерения воздействия боли при раке в выборке из четырех стран: новая информация из многомерной шкалы. Боль 67: 267-273, 1996.

    Serlin RC, Mendoza TR, Nakamura Y, Edwards KR, Cleeland CS. Когда боль при раке бывает легкой, средней или сильной? Оценка степени тяжести боли по ее нарушению функции. Боль 1995; 61: 277-284.

    Первое исследование фазы I на людях BPI-9016M, двойного ингибитора MET / Axl, у пациентов с немелкоклеточным раком легкого | Журнал гематологии и онкологии

  • 1.

    Орган SL, Цао МС. Обзор сигнального пути c-MET. TherAdv Med Oncol. 2011; 3: S7–19.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 2.

    Sierra JR, Tsao MS. c-MET как потенциальная терапевтическая мишень и биомаркер рака. TherAdv Med Oncol. 2011; 3: S21–35.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 3.

    Della Corte CM, Fasano M, Papaccio F, Ciardiello F, Morgillo F.Роль передачи сигналов HGF-MET в первичной и приобретенной устойчивости к таргетной терапии при раке. Биомедицина. 2014; 25 (2): 345–58.

    Артикул

    Google ученый

  • 4.

    Cecchi F, Rabe DC, Bottaro DP. Нацеленность на сигнальный путь HGF / Met в терапии рака. Экспертное мнение. 2012; 16: 553–72.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 5.

    Tsao MS, Liu N, Chen JR, Pappas J, Ho J, To C и др.Дифференциальная экспрессия рецептора фактора роста Met / гепатоцитов при подтипах немелкоклеточного рака легких. Рак легких. 1998; 20: 1–16.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 6.

    Yu HA, Arcila ME, Rekhtman N, Sima CS, Zakowski MF, Pao W., et al. Анализ образцов опухолей во время приобретенной устойчивости к терапии EGFR-TKI у 155 пациентов с EGFR-мутантным раком легких. Clin Cancer Res. 2013. 19 (8): 2240–7.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 7.

    Минари Р., Борди П., Тисео М. Ингибиторы рецептора тирозинкиназы эпидермального фактора роста третьего поколения при T790M-положительном немелкоклеточном раке легкого: обзор возникших механизмов устойчивости. Перевод Lung Cancer Res. 2016; 5: 695–708.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 8.

    Бин Дж., Бреннан С., Ши Дж.Й., Рили Дж., Виале А, Ван Л. и др. Амплификация MET происходит с мутациями T790M или без них в мутантных EGFR опухолях легких с приобретенной устойчивостью к гефитинибу или эрлотинибу.ProcNatlAcad Sci. 2007; 104: 20932–7.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 9.

    Chen HJ, Mok TS, Chen ZH, Guo AL, Zhang XC, Su J, et al. Клинико-патологические и молекулярные особенности мутации рецептора эпидермального фактора роста T790M и амплификации c-MET при китайском немелкоклеточном раке легкого, устойчивом к ингибиторам тирозинкиназы. PatholOncol Res. 2009; 15: 651–8.

    CAS

    Google ученый

  • 10.

    млн лет назад, Джагадисваран Р., Джагадиш С., Третьякова М.С., Налласура В., Фокс Е.А. и др. Функциональная экспрессия и мутации c-Met и его терапевтическое ингибирование с помощью SU11274 и малой интерферирующей РНК при немелкоклеточном раке легкого. Cancer Res. 2005; 65: 1479–88.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 11.

    млн лет назад ПК, Киджима Т., Маулик Дж., Фокс Е.А., Саттлер М., Гриффин Дж. Д. и др. Мутационный анализ c-MET при мелкоклеточном раке легкого: новые мутации юкстамембранного домена, регулирующие функции цитоскелета.Cancer Res. 2003. 63 (19): 6272–81.

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 12.

    Конг-Белтран М., Сешагири С., Чжа Дж., Чжу В., Бхаве К., Мендоза Н. и др. Соматические мутации приводят к онкогенной делеции met при раке легкого. Cancer Res. 2006; 66: 283–9.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 13.

    Kong-Beltran M, Seshagiri S, Zha J, Zhu W., Bhawe K, Mendoza N, et al.Потенциальная роль ингибиторов пути фактора роста гепатоцитов (HGF) -MET в лечении рака. Onco Targets Ther. 2014; 7: 969–83.

    Google ученый

  • 14.

    Розен Л.С., Голдман Дж. У., Альгази А. П., Тернер П. К., Мозер Б., Ху Т. и др. Первое исследование фазы I на людях бивалентного антитела против МЕТ, emibetuzuman (LY2875358), в качестве монотерапии и в комбинации с эрлотинибом при запущенном раке. Clin Cancer Res. 2017; 23: 1910–9.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 15.

    Ruiz-Morales JM, Heng DY. Кабозантиниб в лечении запущенной карциномы почек: доказательства и опыт клинических испытаний. TherAdv Urol. 2016; 8: 338–47.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 16.

    Эсаки Т., Хираи Ф., Макияма А., Сето Т., Бандо Н., Наито Ю. и др. Фаза I исследования повышения дозы капматиниба (INC280) у японских пациентов с запущенными солидными опухолями. Cancer Sci. 2019; 110: 1340–51.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 17.

    Gan H, Millward M, Hua Y, Qi C, Sai Y, Su W и др. Первое исследование фазы I на людях селективного ингибитора МЕТ, саволитиниба, у пациентов с развитой солидной опухолью: безопасность, фармакокинетика и противоопухолевая активность. Clin Cancer Res. 2019; https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-18-1189.

    Артикул

    Google ученый

  • 18.

    Байерс Л.А., Диао Л., Ван Дж. И др. Сигнатура гена эпителиально-мезенхимального перехода предсказывает устойчивость к ингибиторам EGFR и PI3K и определяет Axl как терапевтическую мишень для преодоления устойчивости к ингибиторам EGFR.Clin Cancer Res. 2013; 19: 279–90.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 19.

    Zhang Z, Lee JC, Lin L, et al. Активация киназы AXL вызывает устойчивость к терапии, направленной на EGFR, при раке легких. Нат Жене. 2012; 44: 852–60.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 20.

    Хьюго В., Зарецкий Ю.М., Сан Л. и др. Геномные и транскриптомные особенности ответа на терапию анти-PD-1 при метастатической меланоме.Клетка. 2016; 165: 35–44.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 21.

    Wang C, Jin H, Wang N и др. Ось Gas6 / Axl способствует химиорезистентности и метастазированию при раке молочной железы посредством Akt / GSK-3β / β-катенинсигнализации. Тераностика. 2016; 6: 1205–19.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 22.

    Агилера Т.А., Рафат М., Кастеллини Л. и др. Перепрограммирование иммунологической микросреды с помощью излучения и нацеливания на Axl.Nat Commun. 2016; 7: 13898.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 23.

    Купман Л.А., Терп М.Г., Зом Г.Г. и др. Энапотамабведотин, конъюгат AXL-специфическое антитело-лекарственное средство, проявляет доклиническую противоопухолевую активность при немелкоклеточном раке легкого. JCI Insight. 2019; 4: e128199.

    Артикул

    Google ученый

  • 24.

    Cui X, Zheng X, Jiang J, Tan F, Ding L, Hu P. Одновременное определение нового низкомолекулярного ингибитора с двумя мишенями c-Met / AXL BPI-9016M и его метаболитов в плазме крови человека методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии: применение в фармакокинетическом исследовании у китайских пациентов с развитой солидной опухолью.J Chromatogr B AnalytTechnol Biomed Life Sci. 2017; 1068–1069: 33–40.

    Артикул

    Google ученый

  • 25.

    Zhang P, Li S, Lv C, Si J, Xiong Y, Ding L, et al. BPI-9016M, ингибитор c-Met, подавляет рост опухолевых клеток, миграцию и инвазию аденокарциномы легких через miR203-DKK1. Тераностика. 2018; 8: 5890–902.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 26.

    Уэйкли Х.А., Геттингер С., Энгельман Дж. И др.Исследование фазы Ib / II кабозантиниба (XL184) с эрлотинибом или без него у пациентов с немелкоклеточным раком легкого. Cancer ChemotherPharmacol. 2017; 79: 923–32.

    CAS

    Google ученый

  • 27.

    Нокихара Х., Нишио М., Ямамото Н. и др. Фаза 1 исследования кабозантиниба у японских пациентов с расширенными когортами немелкоклеточного рака легкого. Клинический рак легкого. 2019; 20: e317–28.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 28.

    Wu YL, Zhang L, Kim DW, Liu X, Lee DH, Yang JC и др. Исследование фазы Ib / II капматиниба (INC280) в сочетании с гефитинибом после неэффективности терапии ингибиторами рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) у пациентов с немелкоклеточным раком легкого с мутацией EGFR и нарушенной регуляцией фактора MET. J ClinOncol. 2018; 36: 3101–9.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 29.

    Neal JW, Dahlberg SE, Wakelee HA, Aisner SC, Bowden M, Huang Y, et al. Эрлотиниб, кабозантиниб или эрлотиниб плюс кабозантиниб в качестве терапии второй или третьей линии для пациентов с распространенным немелкоклеточным раком легкого дикого типа EGFR (ECOG-ACRIN 1512): рандомизированный, контролируемый, открытый, многоцентровый, фаза 2 испытания.Ланцет Онкол. 2016; 17: 1661–71.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 30.

    Йошиока Х., Адзума К., Ямамото Н., Такахаши Т., Нишио М., Катаками Н. и др. Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы III эрлотиниба с ингибитором c-Met тивантинибом или без него (ARQ 197) у азиатских пациентов с ранее леченными не плоскоклеточным немелкоклеточным раком легкого стадии IIIB / IV с эпидермальным ростом дикого типа рецептор фактора (ВНИМАНИЕ).Энн Онкол. 2015; 26: 2066–72.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 31.

    Scagliotti G, von Pawel J, Novello S, Ramlau R, Favaretto A, Barlesi F, et al. Фаза III многонационального рандомизированного двойного слепого плацебо-контролируемого исследования тивантиниба (ARQ 197) в сочетании с эрлотинибом в сравнении с одним только эрлотинибом у ранее леченных пациентов с местнораспространенным или метастатическим не плоскоклеточным немелкоклеточным раком легкого. J ClinOncol. 2015; 33: 2667–74.

    CAS
    Статья

    Google ученый

  • 32.

    Cheng Y, Johne A, Scheele J, Wu Y-L, Zhou J, Lu S и др.

  • Оставьте комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *